一、人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用的研究（论文文献综述）
刘昶[1]（2020）在《三种天然产物的抗喉癌活性及分子机制研究》文中研究说明喉癌作为头颈部最普遍的恶性肿瘤之一,其致死率在头颈部肿瘤中排名第三。喉癌的治疗手段在过去的几年里发生了很大的改变。尽管其治疗已经取得了突破性的进展,但在过去20年中,预后并没有显着的改善。为了更深入的了解和增加原发性喉癌的治疗效果和生存率,深层次的了解喉癌的发生机制起到了关键的作用。天然产物是具有不同生物活性的各种结构新化合物的重要来源,作为化疗使用的天然产物具有高效低毒的特点,为肿瘤的治疗提供了更多的可能,具有很高的开发利用价值。因此,从天然资源中寻找新的抗喉癌药物是可行的,可以满足化疗发展的医疗需求。本论文采用MTT法筛选出天然产物中的活性成分,发现其中柯里拉京（Corilagin）、Aspernolide A和Ozoroalide均显示出较好的抑制喉癌活性;运用形态学观察和流式细胞术等技术进行更加的深入研究;采用免疫印迹法进一步确定作用于喉癌细胞的活性成分的特异性信号途径和靶点,并选择活体动物实验进一步验证其体外实验活性和机制,为更有效地寻找和开发抗癌中药提供了新的手段。本文的主要研究结果如下所示:1.柯里拉京的抗喉癌活性及其作用机制研究天然没食子酸衍生物柯里拉京是从“药食同源”的余甘子成熟果实（Phmllanthi Fructus）中分离得到的。细胞活力测定实验结果表明,柯里拉京对喉癌Hep-2和TU212细胞具有明显的体外抗喉癌作用,并且对人支气管上皮样细胞株HBE毒性不明显。进一步的实验表明,柯里拉京以浓度依赖性的方式抑制喉癌细胞Hep-2和TU212的增殖和迁移,并且抑制裸鼠中喉癌移植肿瘤的生长,且没有明显的毒性迹象。研究了柯里拉京的抗喉癌机制后的结果表明,柯里拉京可以通过上调Bax、cleaved Caspase-9和Caspase-3的表达以及下调Bcl-2的表达激活线粒体凋亡通路;柯里拉京可以通过上调cleaved Caspase-12和Caspase-7的表达以及下调GRP78的表达激活内质网应激信号通路;柯里拉京可以通过下调p-Akt、p-GSK-3和p-Bad的表达抑制Akt通路;柯里拉京可以通过下调p-STAT3的表达抑制STAT3通路,从而抑制人喉癌的增殖。2.Aspernolide A的抗喉癌活性及其作用机制研究从喜树根内生真菌枝孢样枝孢霉（Cladosporium cladosporioides）中分离纯化出一种丁内酯次级代谢产物aspernolide A。药理实验结果表明,aspernolide A能明显抑制Hep-2和TU212细胞的生长、迁移和集落成群,且呈浓度和时间依赖性。Bax、cleaved Caspase-9、Caspase-3和PARP的表达随着剂量的增加而增加,而Bcl-2的表达下降,提示凋亡机制可能与线粒体凋亡途径有关。并且,随着剂量的增加,磷酸化的STAT3表达降低,提示其凋亡机制可能与STAT3信号通路有关。这些结论表明aspernolide A具有潜在的抗喉癌作用。3.Ozoroalide的抗喉癌活性及其作用机制研究从草龙（Ludwigia hyssopifolia）中提取分离得到化合物ozoroalide,其对人喉癌细胞株具有细胞毒性,并且对人胚胎肾细胞株HEK293没有明显毒性。倒置显微镜下可观察到Hep-2凋亡细胞的形态变化,如边缘不规则、粘附能力降低、染色质浓缩等。流式细胞仪和荧光显微镜下,经过Annexin V-FITC/PI染色后,可以发现ozoroalide以剂量依赖性的方式诱导Hep-2细胞凋亡。通过对ozoroalide进一步检测,发现其通过影响凋亡相关蛋白Caspase-3对Hep-2细胞株的癌细胞生长具有剂量依赖性的抑制作用。上述研究结果表明柯里拉京、aspernolide A和ozoroalide均有一定的抗喉癌活性。MTT法为寻找新的抗喉癌药物提供简捷的方法;Western blot法能快速检测抗喉癌信号通路;同时,体外细胞实验与体内动物实验的有益结合,能很好的相互验证抗喉癌活性。
陈天丽[2]（2019）在《复方参草菌质颗粒制备工艺及其抗肿瘤活性研究》文中进行了进一步梳理目的:优化人参-冬虫夏草发酵菌质（参草菌质）的发酵工艺和质量标准,建立复方参草菌质颗粒的制备工艺,揭示复方参草菌质颗粒抗肿瘤活性及其作用机理,以期为复方参草菌质颗粒后续的研究和开发奠定基础,为中药复方抗肿瘤提供新的理论依据。方法:1.采用单因素实验和响应曲面等统计学方法对用冬虫夏草菌发酵人参药材的工艺进行系统优化;采用HPLC-Q-TOF-MS技术对参草菌质中主要皂苷类成分进行辅助定性分析;引入HPLC-QQQ-MS技术中的MRM模式,同时对参草菌质中11个皂苷类成分进行了定量分析;按优选工艺制备10批参草菌质,以确定相应含量测定范围。2.MTT法检测含人参复方与含参草菌质复方对非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响,通过检测细胞存活率,对比两个复方的抗肿瘤活性。3.采用正交试验等方法对复方参草菌质颗粒的提取及分离工艺、浓缩干燥工艺、制剂成型工艺等进行研究,制备中试样品,并对不同批次的样品进行质量检查。4.药效学研究方面,首先采用MTT法检测不同浓度的复方参草菌质颗粒对A549细胞增殖的抑制作用;通过划痕实验和Transwell实验检测复方参草菌质颗粒对A549细胞迁移和侵袭的调控作用;利用流式细胞仪检测了药物处理后A549细胞周期和细胞凋亡情况;并通过Western Blot实验检测肿瘤组织中凋亡相关蛋白Caspase3、Bax、Bcl-2的表达及相关通路蛋白TGF-B、smad2、p-smad2、smad3、p-smad3、E-cadherin的表达。进而以接种肺癌细胞的裸鼠为体内模型,检测给药后裸鼠体重和肿瘤体积变化;流式细胞仪检测血液及脾脏细胞中相关表面蛋白CD4、CD8a、CD11b、Ly-6G/Ly-6c的表达。5.采用TMT标记、高效液相色谱分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术,对使用复方参草菌质颗粒水溶液处理A549细胞前后的样本进行定量蛋白组的研究。结果:1.建立了稳定的参草菌质制备工艺,参草菌质的平均得率约为69.8%;通过对参草菌质的主要皂苷类成分进行定性和定量分析,发现其中所含11种皂苷Rg1、Re、Rb1、Rh1、Ro、Rd、Rf、Rb2、Rg3、F2和Rg2的平均含量可以分别达到:1.50mg/g、1.32mg/g、0.64mg/g、1.12mg/g、1.79mg/g、3.56mg/g、0.37mg/g、0.48mg/g、0.33mg/g、0.51mg/g和0.70mg/g;确定了相应成分的含量测定范围,规定参草菌质中人参皂苷Rd不得少于0.3%,人参皂苷Rh1不得少于0.1%,人参皂苷Rb1、Re、Rg1总量不低于0.3%,并最终制定了参草菌质的质量标准。2.对比含参草菌质复方和含人参复方处理A549细胞后细胞的存活率,发现含有参草菌质的复方抗肿瘤效果明显优于含有人参的复方;遵循传统中药制剂的制备特点,采用水煎煮法提取,以代表整体效果的总黄酮提取量为考察指标,确定了复方参草菌质颗粒的最佳提取条件和制剂成型工艺,制备的三批中试样品质量符合《中国药典》2015年版四部附录0104颗粒剂项下的有关规定。3.复方参草菌质颗粒能够显着抑制A549肺癌细胞的增殖,当浓度达到100μg/m L时,其作用最为显着（P<0.05）;流式细胞仪检测结果表明复方参草菌质颗粒能抑制细胞进入G1期,同时降低G1/S期,延长G2期,阻止细胞增殖,诱导A549细胞凋亡;肿瘤相关蛋白检测表明复方参草菌质颗粒能有效调节凋亡相关蛋白的表达;提高Caspase3、Bcl-2和E-cadherin的表达,同时降低TGF-β1、Bax的表达。4.复方参草菌质颗粒对A549细胞的迁移和侵袭具有显着的抑制作用（P<0.01）;对A549肺癌皮下移植肿瘤有一定的治疗效果,能有效改变小鼠血液及脾脏细胞中的免疫蛋白细胞CD4和CD8、细胞Ly-6G/Ly-6C和CD11b的变化,且对免疫蛋白和免疫细胞的刺激作用呈剂量依赖性。5.对复方参草菌质颗粒处理前后的A549细胞进行了定量蛋白质组学检测。一共鉴定了5641个蛋白质,其中4569个蛋白质包含定量信息。以1.2倍为差异表达变化阈值,以统计学检验t-test p-value<0.05为显着性阈值,与对照组相比192个蛋白表达发生上调,272个蛋白表达发生下调。对所有鉴定到的蛋白质进行了系统的生物信息学分析（蛋白功能注释）,并且对所有差异表达蛋白进行了功能分类、功能富集及基于功能富集的聚类分析,进而通过免疫组化、反转录PCR的方法验证了复方参草菌质颗粒靶蛋白HDAC3的表达水平。结论:本研究优化了参草菌质的发酵工艺,制定了参草菌质的质量标准,为制剂开发过程中原料的质量控制提供了理论依据;建立了复方参草菌质颗粒的制备工艺,为后续研究和扩大生产奠定了基础;通过细胞水平证实了复方参草菌质颗粒具有抗肿瘤活性,说明了复方参草菌质颗粒在抑制非小细胞肺癌方面作用显着,并通过蛋白质组学进一步阐释了其作用机理,筛选出潜在作用靶点HDAC3,为肺癌的临床治疗提供了新方向。
赵昀霞[3]（2019）在《人参二醇组皂苷PDS抗喉癌细胞增殖和迁移的作用和机制研究》文中认为研究背景:喉癌是常见的一种头颈部恶性肿瘤,不仅会导致病人死亡,而且癌症和治疗手段会影响病人的吞咽发音等生理活动,所以寻求更优化的治疗手段是目前喉癌的研究热点。临床上喉癌的治疗早期多采用手术治疗和放射治疗,晚期治疗则以放疗和化疗为主。化疗过程中常常合用激素以减少化疗药物的副作用（如过敏,恶心呕吐等）,但是激素大量长时间应用还会引起肾上腺皮质功能亢进、诱发或加重感染、骨质疏松等不良反应。PDS是一种脂溶性分子量小的二醇组提取物,其毒性较小,易于通过血脑屏障。前期对PDS的研究发现,PDS具有地塞米松样与GR结合的作用,可剂量依赖性增加GR介导的荧光素酶转录。还具有抗炎、抗休克、保护心肺功能的作用。临床前和临床研究表明,人参皂苷对胃癌,乳腺癌,肝癌,卵巢癌,结肠癌,黑色素瘤和白血病等多种肿瘤具有预防癌症的活性,那么PDS是否可在喉癌治疗中起到抗癌作用,其机制是否与GR通路激活有关?因此深入研究其在喉癌中的抗癌活性十分必要。研究目的:观察人参二醇组皂苷PDS对人喉癌Hep2细胞增殖和迁移活性的影响,并初步探讨其作用的分子机制,为人参皂苷抑制肿瘤作用提供实验数据和研究基础。方法与结果:1.PDS作用48h后喉癌Hep2细胞生长受抑制、凋亡增加MTT实验结果显示PDS作用48h后,从0.075mg/ml剂量开始可以明显抑制Hep2细胞生长活力,而对于心肌细胞株却没有细胞毒性作用;细胞生长计数、平板克隆形成实验显示,PDS可以明显抑制细胞的增殖能力。流式细胞术显示PDS作用48h后,Hep2细胞出现G2/M期阻滞,Western Blot结果显示PDS可能是通过上调周期相关基因P21和P27与下调Cyclin B1和CDK1的表达,来影响细胞周期进程。FITC-Annexin V/PI流式细胞术、Hoechst染色检测结果显示,与对照组相比,DEX和PDS作用48h后,Hep2细胞凋亡增加;应用Western Blot实验检测,显示与对照组相比,DEX和PDS处理后细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平下调（p<0.05）,促凋亡蛋白Bax和Cleaved-caspase3的表达水平增加（p<0.05）,进一步证明了PDS通过以上机制促进了Hep2细胞凋亡。PDS处理30min前在Hep2细胞中加入半胱天冬酶抑制剂ZVAD,结果显示ZVAD减弱了PDS诱导的Hep2细胞死亡但没有完全挽救细胞死亡,表明PDS可通过caspase凋亡途径诱导细胞死亡,并且还有其他途径参与诱导细胞死亡。2.PDS抑制喉癌Hep2细胞NF-κB信号通路NF-κB信号通路是肿瘤细胞增殖的主要通路,Western Blot结果显示PDS和DEX作用48h后,Hep2细胞中磷酸化IκBα（p-IκBα）表达明显降低（p<0.05）。提取PDS和DEX处理48h后Hep2细胞的细胞浆和细胞核蛋白,检测各组NF-κB异二聚体p65和p50蛋白的表达水平。结果显示,与对照组相比,p65和p50蛋白在细胞浆表达水平显着升高（p<0.05）,而在细胞核的表达明显降低（p<0.05）,说明NF-κB入核减少。最后采用双荧光素酶报告基因法进一步验证NF-κB的转录活性,结果显示其转录活性在细胞加入PDS后明显降低。以上结果说明了PDS抑制p50和p65蛋白入核,NF-κB信号通路的活化被抑制,进而抑制Hep2细胞增殖活性。3.PDS抑制喉癌Hep2细胞上皮-间充质转化（Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT）细胞划痕、Transwell实验结果显示PDS可以明显抑制Hep2细胞的迁移能力;Western Blot结果显示PDS可以下调与转移能力相关的MMP2和MMP9的蛋白表达（p<0.05）。细胞HE染色后形态学分析结果显示,PDS作用48h后,肿瘤细胞表面积、周长均显着增加（p<0.05）,有向上皮细胞分化倾向。q-PCR检测EMT相关基因m RNA水平变化,结果显示,上皮方向分化的标志物上皮性-钙黏蛋白（E-cadherin）表达上调（p<0.05）;间充质标记物神经性-钙黏蛋（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）表达下调（p<0.05）;EMT转录因子锌指蛋白（Snail）的表达下调（p<0.05）。Western Blot实验结果也进一步验证了PDS处理后可以在蛋白质水平影响EMT相关因子和上皮及间充质标志物的表达,趋势与m RNA结果一致,也与形态学变化相符。以上结果说明了PDS抑制了Hep2细胞的EMT。4.PDS抑制经典Wnt/β-连环蛋白途径通过Western blot和q-PCR实验在蛋白和基因水平分别检查了PDS处理的Hep2中β-连环蛋白（β-catenin）的表达。结果显示,PDS可以降低β-catenin的表达（p<0.05）,这可能是PDS抑制了Hep2细胞的EMT的主要分子机制。5.PDS增强了顺铂对喉癌Hep2细胞的抗增殖、促凋亡作用MTT结果显示,与对照组、PDS组、顺铂组相比,0.15mg/ml PDS联合2μg/ml顺铂给药能够明显增加顺铂对Hep2细胞增殖的抑制作用（p<0.05）。Annexin V-FITC流式细胞术发现与对照组、PDS组、顺铂组相比,PDS联合顺铂组能够明显增加顺铂对Hep2细胞的诱导促进凋亡作用（p<0.05）。Western Blot实验发现与对照组、PDS组、顺铂组相比,PDS联合顺铂组能够明显降低细胞内Bcl-2的蛋白表达水平;能够明显增强Bax、Cleaved-caspase3的蛋白表达水平（p<0.05）。以上结果说明了PDS能增加顺铂对喉癌Hep2细胞的抗增殖、促凋亡作用,是有效的化疗辅助药物。结论:1.PDS可以抑制喉癌Hep2细胞增殖能力,使细胞发生周期阻滞,并诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。2.PDS可以抑制喉癌Hep2细胞迁移能力,抑制喉癌细胞上皮-间充质转化,可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。3.PDS联合顺铂能够明显抑制喉癌Hep2细胞增殖,促进细胞发生凋亡。
辛超[4]（2016）在《丝石竹皂甙对人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡的影响及机制研究》文中提出目的:探究丝石竹提取物丝石竹皂甙在体外对人胃腺癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡的影响及其机制。方法:取对数生长期的SGC-7901细胞作为研究对象,实验组加入不同浓度（20、40、80ug/ml）的丝石竹皂甙培养液,以不加入丝石竹皂甙仅加入等体积培养基（含10%胎牛血清）的细胞作为对照组,分别培养24、48、72h。MTT法检测细胞增殖活性;Annexin V/PI双染法结合流式细胞仪分析细胞凋亡;流式细胞术DNA含量分析法分析细胞周期;实时荧光定量PCR检测Wnt5a、Wnt8b基因的表达。结果:（1）①不同浓度的丝石竹皂甙作用相同时间,细胞存活率的差异具有统计学意义（p<0.01）。24h细胞存活率:对照组为100.00%,实验组（按浓度由低到高排列,下同）依次为（82.82±1.64）%、（50.58±1.04）%、（20.00±0.75）%,F=846.157;48h细胞存活率:对照组为100.00%,实验组依次为（76.65±1.48）%、（40.28±1.40）%、（16.38±0.88）%,F=896.265;72h细胞存活率:对照组为100.00%,实验组依次为（70.57±1.60）%、（27.47±1.21）%、（10.09±0.45）%,F=957.040。②相同浓度丝石竹皂甙作用不同时间（对照组除外）,细胞存活率的差异具有统计学意义。当浓度为20ug/ml时,F=45.281,p<0.01;浓度为40ug/ml时,F=212.674,p<0.01;浓度为80ug/ml时,F=129.148,p<0.01。（3）计算求得24小时IC50值为41.171ug/ml。（2）不同浓度的丝石竹皂甙作用24h后应用流式细胞术AV/PI双染法进行细胞凋亡率分析:对照组为（15.11±0.95）%,实验组依次为（20.33±0.78）%、（23.93±1.18）%、（27.67±1.44）%,F=83.215,p<0.01。（3）不同浓度的丝石竹皂甙作用24h后应用流式细胞术DNA含量分析法进行细胞周期分析,结果以百分比表示,G0/G1期:对照组为（53.99±1.35）%,实验组依次为（58.40±1.77）%、（62.40±0.85）%、（65.43±1.18）%,F=42.792,p<0.01;S期:对照组为（31.64±1.30）%,实验组依次为（27.07±1.38）%、（23.11±1.47）%、（19.81±0.70）%,F=53.396,p<0.01。G2期:对照组为（14.71±0.06）%、实验组依次为（14.91±0.18）%、（14.67±007）%、（14.71±0.17）%,F=2.209,p>0.05。（4）不同浓度的丝石竹皂甙作用48h后应用实时荧光定量PCR进行基因表达分析,基因表达结果以相对比表示,Wnt5a/GAPDH1组:对照组为1.70±0.09,实验组依次为1.22±0.10、0.74±0.13、0.58±0.07,F=109.516,p<0.01;Wnt8b/GAPDH1组:对照组为1.18±0.08,实验组依次为0.82±0.07、0.53±0.06、0.42±0.03,F=104.298,p<0.01。结论:丝石竹皂甙可能通过下调Wnt基因的表达,在体外抑制胃癌细胞增殖、促进其凋亡,并使其细胞周期阻滞于G0/G1期,减少S期细胞比例。
杨秀伟,富力[5]（2016）在《人参中三萜类化学成分的生物学活性和药理学作用》文中研究表明人参为五加科多年生草本植物,作为中药和新资源食品应用越来越大众化,在全世界的销售逐渐增长。人参的治疗作用已有广泛的研究,其有效成分人参皂苷具有多样性生物学活性和药理学作用。市场上,有人参根制成的人参标准提取物G115（商品名称为Ginsana）,含有4%人参皂苷。在1963年从人参根分离鉴定出人参皂苷前,人参的现代意义上的作用机制不甚清楚,嗣后,人们致力于每个人参皂苷的功能和分子作用机制评价,1975年后人参皂苷的研究报道呈指数增长。本文评述过去几年间人参及其皂苷重要的生物学活性和药理学作用研究,包括安全性评价、对中枢神经和心脑血管系统的影响、免疫调节活性、对内分泌系统和抗应激作用、抗炎作用、肿瘤细胞毒活性和抗癌作用、抗糖尿病和减肥作用、降脂作用、保肝作用、抗骨质疏松作用、抗疲劳作用、抗老化作用,以及其他作用等,以期为明确人参的药效物质基础提供循证医学依据。
张晓晓[6]（2014）在《人参皂苷的化学转化和对H2O2诱导神经细胞损伤的保护作用及构效关系研究》文中研究说明人参（Panax ginseng C.A.Meyer）在中国药用历史悠久，药效广泛。古代药学典籍记载它“主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目开心益智，久服轻身延年”。这些功效后来逐渐地被现代药理学所阐释。人参皂苷是人参的主要活性成份，它几乎可以重现人参粗制剂的全部药理活性。人参皂苷丰富的结构为广泛的药理活性提供了物质基础。人参皂苷不仅包括直接从人参中分离得到的人参皂苷Re、Rb1、Rd等，还包括人参皂苷经体内或体外代谢产生的次级皂苷。人参皂苷随着结构的不同，药理活性也表现出差异，这为人参皂苷构效关系的研究奠定了基础。大量研究显示人参皂苷具有调节中枢神经系统，抗氧化，延缓衰老等作用。本文以人参茎叶总皂苷、三七茎叶总皂苷及三七叶苷为原料，采用高温常压碱降解法，醋酸加热降解法，硫酸转化法分别得到其转化物，进一步采用多步硅胶层析法对其进行分离提纯；采用核磁共振技术对所得的人参皂苷单体化合物进行了结构确证；应用正交实验设计法，优化了以人参茎叶总皂苷为原料高温碱降解法同时制备20（S）-原人参二醇，20（S）-原人参三醇，20（S）-Rh2和20（S）-Rg3的工艺；采用过氧化氢（hydrogen peroxide，H2O2）为外源性自由基生成系统，以SH-SY5Y细胞和C6细胞作为实验对象，模拟神经细胞的氧化损伤，选取几种较好的反映人参皂苷结构变化的人参皂苷、人参次苷和皂苷元，观察它们对氧化损伤的SH-SY5Y细胞和C6细胞的保护作用；评价了它们的构效关系，为人参神经系统疾病药物的开发，以及某些神经系统疾病的治疗提供依据。主要研究结果如下:（1）三七茎叶总皂苷250℃碱降解30分钟，产物经硅胶柱层析，以石油醚：乙酸乙酯（1：3）、二氯甲烷：丙酮（8：2）为溶剂系统，洗脱得到五种化合物，经结构确证为20（S）-原人参二醇，20（S）-原人参三醇，（20S，24R）-Ocotillol，20（S）-人参二醇，20（S）-人参三醇，其中（20S，24R）-Ocotillol在三七茎叶总皂苷的碱降解产物中首次发现。（2）人参茎叶总皂苷210℃碱降解2小时的产物经硅胶柱层析，以乙酸乙酯：甲醇（8：2），二氯甲烷：甲醇（7：1.1），氯仿：甲醇：水（7：3：0.5）为溶剂系统，洗脱重结晶得到两种化合物，经确证为20（S）-人参皂苷Rh2，20（S）-人参皂苷Rg3。（3）以三七叶苷为原料，醋酸降解，经硅胶柱层析分离得到20（R）-人参皂苷Rh2，20（R）-人参皂苷Rg3。（4）以20（S）-原人参二醇，20（S）-原人参三醇为原料经硫酸转化，层析分离分别得到C20位的差向异构体20（R）-原人参二醇，20（R）-原人参三醇以及20（R）-人参二醇，20（R）-人参三醇。（5）以三七叶苷为原料，浓盐酸水解，经硅胶柱层析得到20（R）-人参二醇，20（R）-原人参二醇，以及化合物14和15，经核磁1H-NMR和13C-NMR未确证其结构。（6）应用正交实验设计法，优化了人参茎叶总皂苷高温碱降解同时制备20（S）-原人参二醇，20（S）-原人参三醇，20（S）-Rh2和20（S）-Rg3的最佳工艺为：在甘油量一定的条件下皂苷浓度为10%，NaOH浓度为5%，反应温度为250℃，反应时间为2.5h。（7）建立了H2O2损伤SH-SY5Y细胞和C6细胞的模型，C6细胞以600μmol/L的H2O2作用4h，SH-SY5Y细胞以700μmol/L的H2O2作用4h，在实验条件下细胞的损伤率在30%。（8）MTT法检测不同人参皂苷处理对H2O2损伤SH-SY5Y细胞和C6细胞存活率的影响、LDH释放的影响：与模型组相比，人参皂苷Rb1，Re，Rg1，20（R）-Rg3，20（R）-Rh2能明显的提高H2O2损伤SH-SY5Y细胞和C6细胞的存活率，减少LDH的释放；人参皂苷20（R）-原人参二醇，20（R）-原人参三醇，低浓度的20（S）-Rg3，20（S）-Rh2，20（R）-人参二醇，20（R）-人参三醇能不同程度的提高H2O2损伤SH-SY5Y细胞和C6细胞的存活率，降低LDH的释放；20（S）-原人参二醇，20（S）-原人参三醇，20（S）-人参二醇，20（S）-人参三醇对于H2O2损伤SH-SY5Y细胞和C6细胞的存活率提高不显着。（9）人参皂苷单体对H2O2损伤SH-SY5Y细胞MDA、SOD的影响为：几种人参皂苷可以不同程度的降低细胞内MDA的含量，提高SOD的含量。（10）人参皂苷单体对H2O2损伤SH-SY5Y和C6细胞保护作用的构效关系为：从人参总皂苷里直接分离得到未经转化的人参皂苷Rb1、Re、Rg1对H2O2损伤细胞有明显的保护作用；原人参二醇型的皂苷保护作用强于原人参三醇型的皂苷；C20位R型次级人参皂苷在对H2O2损伤细胞的保护作用方面明显强于S型次级皂苷；随着糖链的减少，保护作用逐渐减弱；侧链环化的人参皂苷的保护作用较弱。
孙德亚[7]（2014）在《达玛烷型人参皂苷元结构修饰及其抗肿瘤活性研究》文中研究说明人参，五加科（Araliaceae）人参属（Panax）植物人参（Panax ginseng C.A.Meyer）的干燥根及根茎，是驰名中外的名贵药材。达玛烷型人参皂苷及其苷元是人参抗癌的主要药效成分，是很有前景的抗肿瘤候选药物分子。人参皂苷具有低毒性、高效性、靶向性的优势，对达玛烷型人参皂苷进行结构修饰，是研制新型抗肿瘤药物的一种重要思路。本论文在课题组前期工作的基础上，以人参根总皂苷为原料，采用酸降解方法对其降解，经分离纯化获取修饰底物达玛烷型人参皂苷元20（R）-人参二醇（化合物1）和20（R）-人参三醇（化合物2）。对二者进行乙酰氯侧链开环反应，实验方法较先前的侧链开环方法操作简单，产物产率提高，副产物少且反应试剂毒性较低。共计得到6个修饰产物，分别为达玛-（Z）-20（22）-烯-3,12-二乙酰-25-羟基（化合物3）、达玛-（E）-20（22）-烯-3,12-二乙酰-25-羟基（化合物4）、20（R）-3-乙酰-人参二醇（化合物5）、达玛-（Z）-20（22）-烯-3,6,12-三乙酰-25-羟基（化合物6）、达玛-（E）-20（22）-烯-3,6,12-三乙酰-25-羟基（化合物7）和20（R）-3,6-二乙酰-人参三醇（化合物8），其中化合物3和化合物4，化合物6和化合物7互为顺反异构，为新化合物，至今未见文献报道。应用MTT法测定修饰产物对人喉癌细胞HP-2的增殖抑制作用。结果显示，人参皂苷元20（R）-人参二醇和20（R）-人参三醇的修饰产物对HP-2癌细胞增殖均有不同程度的抑制作用，其中20（R）-人参三醇的修饰产物的肿瘤抑制活性强于20（R）-人参二醇的修饰产物；且各自修饰产物中E构型产物的抑制活性强于Z构型产物。本论文通过对达玛烷型人参皂苷元20（R）-人参二醇和20（R）-人参三醇的C-17位侧链进行修饰，得到了六元含氧环侧链打开的修饰产物，减小了C-12位的空间位阻，并对体外抗肿瘤活性进行了初步测定，为进一步的结构修饰提供理论依据及提供活性好的候选抑肿瘤活性分子。
张大力[8]（2012）在《20（R）-人参皂甙Rg3诱导肺腺癌细胞A549凋亡作用机制的研究》文中研究说明目的：探讨20（R）-人参皂甙Rg3诱导人肺腺癌细胞株A549细胞凋亡的作用及其机制。为20（R）—人参皂甙Rg3在临床治疗非小细胞肺癌（NSCLC）的应用中提供更多理论基础和实验依据,促进20（R）—人参皂甙Rg3抗肿瘤药物的进一步开发和更广泛的临床应用。方法：1.MTT法检测药物的半数抑制浓度及不同浓度G-Rg3作用24、72、120小时对人肺腺癌细胞A549细胞增殖的影响；2.流式细胞术分析不同浓度G-Rg3作用72、120小时对人肺腺癌细胞A549细胞周期及细胞凋亡的影响；3.Westren blotting检测G-Rg3对人肺腺癌细胞A549细胞相关蛋白表达的影响；结果：1.G-Rg3对人肺腺癌细胞A549细胞半数抑制浓度为740μmol/mL;低浓度G-Rg3培养24小时、72小时、120小时对人肺腺癌A549细胞的抑制率与对照组相比差异均无统计学意义（P>0.05）。2.流式细胞仪检测5种不同浓度的G-Rg3作用72、120小时后对人肺腺癌A549细胞各期的细胞比率与对照组的细胞比率差异无统计学意义（P>0.05）,同时检测G-Rg3对人肺腺癌A549细胞凋亡率,对照组与各浓度组间有明显差异,并呈时间浓度依赖性。3.Western blotting结果表明：不同时间／不同浓度G-Rg3作用肺腺癌A549细胞能活化caspase-3/caspase-8级联,上调Bax、下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bid、Cyto-c的蛋白表达,并呈浓度时间依赖性。结论：1.人参皂甙Rg3可诱导人肺腺癌A549细胞发生凋亡,其促进凋亡作用随Rg3浓度的增大和作用时间的延长而增加。2.人参皂甙Rg3能通过上调Bax、下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bid、Cyto-c的蛋白表达从而诱导A549细胞的凋亡。3.caspase-3/caspase-8级联也是人参皂甙Rg3诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的关键信号途径。
刘晓岩[9]（2011）在《人参有效成分对白血病KG1α细胞增殖抑制作用及其机制的探讨》文中进行了进一步梳理采用化学药物治疗恶性肿瘤是临床治疗学中发展最快的领域之一,迄今研制的化学抗肿瘤药物多是细胞毒性强的药物,它们不能克服毒副作用大和选择性差的障碍。一方面许多肿瘤细胞还存在不同程度的对抗肿瘤化学药物不敏感,低剂量难以抑制肿瘤细胞的恶性增殖,高剂量又会导致机体组织器官的严重损伤,另一方面机体的造血与免疫系统等又对化疗药物极为敏感,即使较低剂量也可导致这些系统不可逆转的破坏。中医药现代化的核心内容之一是为中医药的理论体系提供现代科学的理论基础和实验依据。值得注意的是中医药在治疗肿瘤中已积累丰富的资料,中药的良好效果日渐受到人们的认可。若对初步筛选的抗肿瘤中药再通过现代生物医学技术对其进行结构分析、模似修饰、药理与毒理深入研究,完全有可能开发出全新、高效、低毒的抗肿瘤药物。目的:研究人参总皂甙（TSPG）和人参皂甙单体Rh2（S）对人急性髓系白血病细胞株KG1α增殖抑制的作用以及对细胞周期和凋亡的影响,并用免疫细胞化学和分子生物学的方法验证TSPG干扰KG1α生长的可能机制。方法:取对数生长期的KG1α细胞,调整密度为5×108/ L,空白对照组予以常规培养;人参总皂甙TSPG组分别加入0.1,0.2,0.4,0.6,0.8 g/L TSPG。采用MTT比色法测定细胞存活率,瑞氏染色法以及光镜、电镜观察细胞形态学改变。流式细胞仪测定细胞周期分布的变化以及细胞的凋亡率。免疫细胞化学的方法检测细胞中β-catenin和NF-κBp65蛋白表达的变化。RT-PCR半定量检测细胞中β-catenin、NF-κBp65、CyclinD1和TCF4的mRNA水平的变化。Western blot半定量检测细胞中β-catenin、NF-κBp65、CyclinD1和TCF4蛋白水平的变化。取对数生长期的KG1α细胞,调整密度为5×108/ L,空白对照组予以常规培养;人参皂甙单体Rh2（s）组分别加入0.03,0.035,0.04,0.045,0.05 g/L Rh2（s）。采用MTT比色法测定细胞存活率,瑞氏染色法以及光电镜观察细胞形态学改变。流式细胞仪测定细胞周期分布的变化以及细胞的凋亡率。结果:人参总皂甙TSPG在体外对KG1α增殖具有明显抑制作用。在0.1—0.8g/L TSPG浓度范围内,其抑制作用呈浓度依赖性,在浓度0.4g/L处达到细胞的半数抑制率,且在48h抑制率达到高峰。与空白对照组比较,经0.4g/L TSPG作用48h后,可见细胞由成团聚集生长变为分散生长,细胞数量明显减少;细胞明显分化,产生核分裂像;部分细胞凋亡,胞质中产生大量空泡并出现凋亡小体;KG1α细胞周期分布无明显变化;细胞凋亡率显着增高;免疫细胞化学显示细胞内β-catenin和NF-κBp65蛋白表达降低,其表达区域由胞核向胞膜转移;RT-PCR半定量检测细胞中β-catenin、NF-κBp65、CyclinD1和TCF4的mRNA的水平降低。Western blot半定量检测细胞中β-catenin、NF-κBp65和TCF4的蛋白水平下降。人参皂甙单体Rh2（s）在体外对KG1α增殖具有明显抑制作用。在0.03—0.05g/L Rh2（s）浓度范围内,其抑制作用呈浓度依赖性,在浓度0.04g/L处达到细胞的半数抑制率,且在48h抑制率达到高峰。与空白对照组比较,经0.04g/L Rh2（s）作用48h后,也可见细胞呈分散生长,数量明显减少;部分细胞分化产生核分裂像,还有部分细胞凋亡,胞质中出现空泡以及凋亡小体;空白对照组与体外培养48h后0.04g/L Rh2（S）组G0/G1期和G2 +M期的细胞分布结果相比,差别有统计学意义。而两组的S期差别无统计学意义。此外,经Rh2（S）处理后细胞凋亡率也明显增高。结论:人参总皂甙TSPG可抑制KG1α细胞增殖,诱导细胞凋亡,且TSPG抑制KG1α细胞增殖的作用机制可能与其降低β-catenin、NF-κBp65、CyclinD1和TCF4的mRNA的水平,抑制β-catenin、NF-κBp65和TCF4的蛋白表达有关。人参皂甙单体Rh2（S）可抑制KG1α细胞增殖,将KG1α阻滞于G0/G1期。FCM测细胞凋亡率的结果显示,Rh2（S）可诱导细胞凋亡。在TSPG的实验研究中,对照组凋亡率为（8.49±0.66）%,TSPG组凋亡率为（23.56±0.99）%;在Rh2（S）的实验研究中,对照组凋亡率为（2.58±0.40）%,Rh2（S）组的凋亡率为（10.44±3.17）%。TSPG引起细胞凋亡率改变的幅度与Rh2（S）引起细胞凋亡率改变的幅度没有统计学差异。由此可见,Rh2（S）诱导细胞凋亡的能力与TSPG相当,但其作用机制有可能与TSPG不同,这有待我们进一步研究探讨。
彭林涛,许欣[10]（2010）在《人参皂甙Rh2对食管癌Eca-109细胞caspase3、caspase8基因的影响》文中指出目的:探讨人参皂甙Rh2诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡过程中caspase3、caspase8凋亡调节基因的相互关系及可能的作用机制.方法:应用MTT法测定其对细胞的生长抑制作用,流式细胞术分析人参皂甙Rh2作用后细胞凋亡及增殖的变化,应用免疫细胞化学及Western blot技术检测用药前后凋亡相关基因caspase3、caspase8蛋白表达的变化.结果:人参皂甙Rh2对人食管癌Eca-109细胞有生长抑制作用,并呈时效和量效依赖关系.流式细胞仪分析结果发现,食管癌Eca-109细胞在DNA组方图上出现典型的亚二倍体峰即凋亡峰,在细胞周期中的分布也发生了明显的变化,其48h凋亡率明显高于对照组（19.10%±2.12% vs 2.10%±0.87%,P<0.01）.免疫细胞化学及Western blot技术结果显示,20mg/L人参皂甙Rh2作用72h后食管癌Eca-109细胞caspase3、caspase8蛋白表达明显升高（0.35±0.04 vs 0.10±0.02,0.84±0.06 vs 0.31±0.11,均P<0.05）.结论:人参皂甙Rh2具有诱导食管癌Eca-109细胞凋亡和抑制细胞分化的作用,其分子机制可能是上调caspase3、caspase8蛋白表达.
二、人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用的研究（论文提纲范文）
（1）三种天然产物的抗喉癌活性及分子机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写索引 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 喉癌简述 |
| 1.1.1 喉癌的病因 |
| 1.1.2 喉癌的诊断 |
| 1.1.3 喉癌的治疗 |
| 1.2 天然产物治疗喉癌的研究进展 |
| 1.3 喉癌与凋亡相关蛋白的研究进展 |
| 1.4 天然产物治疗喉癌的信号通路简述 |
| 1.5 天然产物的抗喉癌意义及展望 |
| 第二章 柯里拉京的抗喉癌活性及其作用机制研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 仪器与试剂 |
| 2.2.1 试验用细胞株 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 实验试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 柯里拉京的制备 |
| 2.3.2 细胞活力测定及形态学变化 |
| 2.3.3 细胞划痕实验 |
| 2.3.4 Western blot |
| 2.3.5 体内实验 |
| 2.3.6 Hoechst33258 染色实验 |
| 2.3.7 流式细胞术(FACS) |
| 2.3.8 统计分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 柯里拉京对喉癌细胞生长及迁移的抑制作用 |
| 2.4.2 柯里拉京对Hep-2裸鼠移植瘤的抑制作用 |
| 2.4.3 柯里拉京诱导喉癌凋亡的体内外研究 |
| 2.4.4 柯里拉京对内质网应激相关蛋白的体内外抑制作用 |
| 2.4.5 柯里拉京抑制蛋白Akt和 STAT3 的体内外活性 |
| 2.5 讨论 |
| 第三章 Aspernolide A的抗喉癌活性及其作用机制研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 仪器与试剂 |
| 3.2.1 试验用细胞株 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 实验试剂 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 细胞活力测定及细胞凋亡的形态学观察 |
| 3.3.2 细胞划痕实验及集落形成实验 |
| 3.3.3 流式细胞术(FACS) |
| 3.3.4 Western blot |
| 3.3.5 统计分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 Aspernolide A对喉癌细胞活力的影响 |
| 3.4.2 Aspernolide A对喉癌细胞迁移和集落形成的影响 |
| 3.4.3 Aspernolide A对喉癌细胞形态变化及凋亡的影响 |
| 3.4.4 Aspernolide A对喉癌细胞线粒体凋亡途径的影响 |
| 3.4.5 Aspernolide A对喉癌细胞STAT3 信号通路的影响 |
| 3.5 讨论 |
| 第四章 Ozoroalide的抗喉癌活性及其作用机制研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 仪器与试剂 |
| 4.2.1 试验用细胞株 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.2.3 实验试剂 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 细胞活力测定及细胞凋亡的形态学观察 |
| 4.3.2 流式细胞术(FACS) |
| 4.3.3 Western blot |
| 4.3.4 统计分析 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 Ozoroalide对喉癌细胞活力的影响 |
| 4.4.2 Ozoroalide对喉癌Hep-2 细胞形态变化的影响 |
| 4.4.3 Ozoroalide对喉癌Hep-2 细胞凋亡的影响 |
| 4.4.4 Ozoroalide对喉癌Hep-2 细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响 |
| 4.5 讨论 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 化合物图谱 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（2）复方参草菌质颗粒制备工艺及其抗肿瘤活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 实验研究 |
| 第一章 参草菌质发酵工艺优化及其质量控制标准研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 复方参草菌质颗粒制备工艺研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法与结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 复方参草菌质颗粒抗肿瘤活性研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 复方参草菌质颗粒在A549 细胞中的定量蛋白质组学研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论与小结 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间科研成果 |
| 个人简历 |
（3）人参二醇组皂苷PDS抗喉癌细胞增殖和迁移的作用和机制研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词表 |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 喉癌 |
| 1.1.1 喉癌的流行病学特点 |
| 1.1.2 喉癌的治疗进展 |
| 1.1.3 喉癌的预后及影响因素 |
| 1.2 人参二醇组皂苷PDS及其代谢产物在肿瘤中的研究进展 |
| 1.2.1 人参二醇组皂苷的化学结构和代谢 |
| 1.2.2 人参二醇组皂苷的抗癌作用 |
| 1.2.3 本课题组对人参二醇组皂苷的研究 |
| 1.2.4 总结 |
| 1.3 核因子（NF-κB）信号通路 |
| 第2章 实验部分 |
| 2.1 PDS对喉癌Hep2细胞增殖的抑制作用 |
| 2.1.1 实验材料及设备 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.3 实验结果 |
| 2.1.4 讨论 |
| 2.1.5 小结 |
| 2.2 PDS对喉癌Hep2细胞侵袭和迁移的抑制作用 |
| 2.2.1 实验材料及设备 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.2.3 实验结果 |
| 2.2.4 讨论 |
| 2.2.5 小结 |
| 2.3 PDS与顺铂联合抑制喉癌Hep2细胞的生长 |
| 2.3.1 实验材料及设备 |
| 2.3.2 实验方法 |
| 2.3.3 实验结果 |
| 2.3.4 讨论 |
| 2.3.5 小结 |
| 第3章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所获得的科研成果 |
| 致谢 |
（4）丝石竹皂甙对人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 实验材料 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要试剂和来源 |
| 1.3 主要仪器和来源 |
| 1.4 主要工作液的配置 |
| 1.5 引物序列 |
| 第二章 实验方法 |
| 2.1 MTT法检测细胞增殖活性 |
| 2.2 流式细胞仪Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡 |
| 2.3 流式细胞仪DNA含量分析法检测细胞周期 |
| 2.4 实时荧光定量PCR检测基因表达 |
| 2.5 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 细胞增殖活性分析 |
| 3.2 细胞凋亡分析 |
| 3.3 细胞周期分析 |
| 3.4 实时荧光定量PCR分析 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 攻读学位期间研究成果 |
| 致谢 |
（5）人参中三萜类化学成分的生物学活性和药理学作用（论文提纲范文）
| 1 安全性评价 |
| 2 生物学活性和药理学作用 |
| 2. 1 对中枢神经和心脑血管系统的影响 |
| 2. 2 免疫调节活性 |
| 2. 3 对内分泌系统和抗应激作用 |
| 2. 4 抗炎作用 |
| 2. 5 肿瘤细胞毒活性和抗癌作用 |
| 2. 6 抗糖尿病和降脂、减肥作用 |
| 2. 7 保肝作用 |
| 2. 8 抗骨质疏松作用 |
| 2. 9 抗疲劳作用 |
| 2. 10 抗衰老作用 |
| 2. 11 其他作用 |
| 3 结语 |
（6）人参皂苷的化学转化和对H2O2诱导神经细胞损伤的保护作用及构效关系研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要符号表 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 人参的化学成分研究 |
| 1.1.1 三萜皂苷 |
| 1.1.2 低聚糖和多糖类 |
| 1.1.3 聚烯炔类 |
| 1.1.4 黄酮类 |
| 1.1.5 倍半萜类 |
| 1.2 人参皂苷的提取及转化方法研究 |
| 1.2.1 人参皂苷的提取方法 |
| 1.2.2 人参皂苷的转化方法 |
| 1.2.2.1 酸降解法 |
| 1.2.2.2 碱降解法 |
| 1.2.2.3 酶降解法 |
| 1.2.2.4 微生物降解法 |
| 1.2.2.5 Smith 降解法 |
| 1.2.2.6 加热降解法 |
| 1.3 人参皂苷的药理活性研究 |
| 1.3.1 对心血管系统的作用 |
| 1.3.2 对免疫功能的作用 |
| 1.3.3 对内分泌系统的影响 |
| 1.3.4 对神经系统的影响 |
| 1.3.5 抗肿瘤作用 |
| 1.4 人参皂苷与神经系统疾病及其作用机制概述 |
| 1.4.1 人参皂苷与神经系统疾病 |
| 1.4.1.1 脑血管疾病 |
| 1.4.1.2 神经退行性疾病 |
| 1.4.1.3 周围神经损伤 |
| 1.4.2 人参皂苷对脑神经保护作用机制 |
| 1.4.2.1 对钙通道的拮抗作用 |
| 1.4.2.2 影响神经递质，抑制神经毒性 |
| 1.4.2.3 抗氧化作用 |
| 1.4.2.4 对一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的影响 |
| 1.4.2.5 抑制脑神经细胞凋亡 |
| 1.4.2.6 稳定生物细胞膜 |
| 1.4.2.7 保护神经突触 |
| 1.5 研究的内容、目的及意义 |
| 2 人参皂苷结构的化学修饰与转化 |
| 2.1 材料与仪器 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器 |
| 2.1.4 试剂的配制 |
| 2.2 皂苷的降解及产物的分离纯化 |
| 2.2.1 三七茎叶总皂苷碱降解制备 20（S）-原人参二醇和 20（S）-原人参三醇 |
| 2.2.2 人参茎叶总皂苷制备 20（S）-Rh2 和 |
| 2.2.3 20（S）-原人参二醇的酸降解 |
| 2.2.4 20（S）-原人参三醇的酸降解 |
| 2.2.5 三七叶苷醋酸降解分离纯化 |
| 2.2.6 三七叶苷醋酸降解分离纯化 |
| 2.2.7 三七叶苷的浓盐酸水解 |
| 2.3 人参次苷的化学结构确证 |
| 2.3.1 化合物 1 的结构确证 |
| 2.3.2 化合物 2 的结构确证 |
| 2.3.3 化合物 3 的结构确证 |
| 2.3.4 化合物 4 的结构确证 |
| 2.3.5 化合物 5 的结构确证 |
| 2.3.6 化合物 6 的结构确证 |
| 2.3.7 化合物 7 的结构确证 |
| 2.3.8 化合物 8 的结构确证 |
| 2.3.9 化合物 9 的结构确证 |
| 2.3.10 化合物 10 的结构确证 |
| 2.3.11 化合物 11 的结构确证 |
| 2.3.12 化合物 12 的结构确证 |
| 2.3.13 化合物 13 的结构确证 |
| 3 正交实验优化碱降解四种稀有人参次苷工艺 |
| 3.1 试剂与仪器 |
| 3.2 碱降解正交试验方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 4 人参皂苷对神经细胞损伤的保护作用 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 主要试剂 |
| 4.1.2 主要仪器及设备 |
| 4.1.3 细胞 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 试剂的配制 |
| 4.2.2 细胞的培养 |
| 4.3 实验检测 |
| 4.3.1 人参皂苷对 C6 细胞和 SH-SY5Y 细胞的毒性研究 |
| 4.3.2 H_2O_2诱导 C6 细胞和 SH-SY5Y 细胞损伤模型 |
| 4.3.3 人参皂苷对 H_2O_2损伤的 C6 细胞和 SH-SY5Y 细胞活性的影响 |
| 4.3.3.1 MTT 法检测细胞活性 |
| 4.3.3.2 LDH 释放量的测定 |
| 4.3.4 人参皂苷对 H_2O_2损伤的 SH-SY5Y 细胞氧化应激的影响 |
| 4.3.4.1 酶生化法测定 MDA、SOD 活力 |
| 4.4 数据处理 |
| 4.5 实验结果与分析 |
| 4.5.1 人参皂苷对 C6 细胞和 SH-SY5Y 细胞的毒性作用 |
| 4.5.1.1 几种人参皂苷对 C6 细胞的毒性作用 |
| 4.5.1.2 几种人参皂苷对 SH-SY5Y 细胞的毒性作用 |
| 4.5.2 H_2O_2诱导 C6 细胞和 SH-SY5Y 细胞损伤模型 |
| 4.5.3 MTT 法检测药物处理组细胞活力 |
| 4.5.4 人参皂苷处理对 LDH 释放的影响 |
| 4.5.5 人参皂苷对 H_2O_2损伤 SH-SY5Y 细胞内 MDA 含量的影响 |
| 4.5.6 人参皂苷对 H_2O_2损伤 SH-SY5Y 细胞内 SOD 含量的影响 |
| 4.6 人参皂苷对 H_2O_2损伤的神经细胞保护作用构效关系评价 |
| 4.7 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录一攻读学位期间发表的学术论文 |
| 附录二 |
（7）达玛烷型人参皂苷元结构修饰及其抗肿瘤活性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 达玛烷型人参皂苷的分类 |
| 1.2 达玛烷型人参皂苷（元）结构修饰研究进展 |
| 1.3 达玛烷型人参皂苷的抗肿瘤活性研究进展 |
| 1.4 立题依据 |
| 第2章 20(R)-人参二醇和 20(R)-人参三醇的制备 |
| 2.1 实验仪器、材料与试剂 |
| 2.2 人参根总皂苷的降解 |
| 2.3 人参根总皂苷酸降解物中分离得到的化合物的结构鉴定 |
| 2.4 化合物的结构鉴定 |
| 第3章 20(R)-人参二醇和 20(R)-人参三醇的结构修饰 |
| 3.1 实验仪器、材料与试剂 |
| 3.2 20(R)-人参二醇和 20(R)-人参三醇的乙酰氯开环结构修饰 |
| 3.3 结构修饰得到的化合物 |
| 3.4 化合物的结构鉴定 |
| 3.5 修饰产物的结构鉴定数据 |
| 第4章 结构修饰产物体外抗肿瘤活性的研究 |
| 4.1 实验仪器、药品与材料 |
| 4.2 实验原理 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.4 实验结果 |
| 第5章 结论和建议 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 建议 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（8）20（R）-人参皂甙Rg3诱导肺腺癌细胞A549凋亡作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文对照及缩略语 |
| 绪论 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 统计学分析 |
| 第二章 实验结果 |
| 第三章 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
（9）人参有效成分对白血病KG1α细胞增殖抑制作用及其机制的探讨（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一章 人参总皂甙(TSPG)对人白血病细胞株(KG1α)增殖抑制作用及其机制的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 图片 |
| 第二章 人参皂甙单体Rh2(s)对人白血病细胞株(KG1α)增殖抑制作用的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 图片 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 硕士期间发表的论文 |
（10）人参皂甙Rh2对食管癌Eca-109细胞caspase3、caspase8基因的影响（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 细胞实验及分组: |
| 1.2.2 细胞的生长抑制: |
| 1.2.3 FCM检测细胞凋亡和周期变化: |
| 1.2.4 免疫细胞化学检测: |
| 1.2.5 Western blot检测细胞凋亡基因蛋白的表达: |
| 2 结果 |
| 2.1 MTT法测定细胞生长抑制 |
| 2.2 流式细胞仪分析细胞凋亡和细胞周期 |
| 2.3 免疫细胞化学检测 |
| 2.4 Western blot检测细胞凋亡基因蛋白的表达 |
| 3 讨论 |
四、人参单体皂甙Rh2对人喉癌细胞株Hep-2抗增殖作用的研究（论文参考文献）
- [1]三种天然产物的抗喉癌活性及分子机制研究[D]. 刘昶. 中南民族大学, 2020(07)
- [2]复方参草菌质颗粒制备工艺及其抗肿瘤活性研究[D]. 陈天丽. 长春中医药大学, 2019(03)
- [3]人参二醇组皂苷PDS抗喉癌细胞增殖和迁移的作用和机制研究[D]. 赵昀霞. 吉林大学, 2019(12)
- [4]丝石竹皂甙对人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡的影响及机制研究[D]. 辛超. 青岛大学, 2016(02)
- [5]人参中三萜类化学成分的生物学活性和药理学作用[J]. 杨秀伟,富力. 中国现代中药, 2016(01)
- [6]人参皂苷的化学转化和对H2O2诱导神经细胞损伤的保护作用及构效关系研究[D]. 张晓晓. 烟台大学, 2014(01)
- [7]达玛烷型人参皂苷元结构修饰及其抗肿瘤活性研究[D]. 孙德亚. 吉林大学, 2014(11)
- [8]20（R）-人参皂甙Rg3诱导肺腺癌细胞A549凋亡作用机制的研究[D]. 张大力. 延边大学, 2012(02)
- [9]人参有效成分对白血病KG1α细胞增殖抑制作用及其机制的探讨[D]. 刘晓岩. 重庆医科大学, 2011(11)
- [10]人参皂甙Rh2对食管癌Eca-109细胞caspase3、caspase8基因的影响[J]. 彭林涛,许欣. 世界华人消化杂志, 2010(36)