一、补肾调肝方对少精症大鼠生精作用及睾酮影响的研究（论文文献综述）
李小英[1]（2021）在《基于睾丸支持细胞研究4.1R蛋白在少精症小鼠模型中的作用机制》文中指出不育症是严重影响哺乳动物繁殖能力的一类生殖系统疾病。营养缺乏、饲养管理不当、季节性原因、遗传原因（如杂交不育）和疾病等均可导致不育。在引起哺乳动物不育的因素中,雄性因素约占一半左右。无精子症、少精子症、弱精子症、精子无力症等是引起雄性不育的主要病因。少精症是以精子数量显着稀少为特征的雄性不育症类型,病因复杂发生机制仍不十分明确。遗传因素和环境因素均可导致精子数量减少,遗传因素对精子数量的影响主要通过精子形成过程中相应基因的表达和调控作用来实现。因此,寻找影响精子形成的特异性靶基因（蛋白）并阐释其作用机制,对于少精症的精准治疗和预后具有重要的理论价值和意义。4.1R蛋白是一种由epb41基因编码的细胞膜骨架蛋白组分,在红细胞和多种非红细胞组织中发挥作用。本文从以下三个方面阐述4.1R蛋白基于睾丸支持细胞在少精症发生中的作用机制:（1）以雷公藤多苷溶液诱导雄性C57BL/6J小鼠（7周龄）构建的少精症模型小鼠为研究对象,利用western blotting、q-PCR和免疫荧光技术检测4.1R蛋白在少精症小鼠睾丸内的表达特点。利用异硫氰酸荧光素（FITC）睾丸活体注射检测少精症模型小鼠血睾屏障完整性,并检测血睾屏障形成相关蛋白的表达,阐述4.1R蛋白表达与睾丸支持细胞（Sertoli）连接功能间的相关性。检测Wnt/β-catenin信号通路组分在少精症模型小鼠睾丸内的表达特点,阐述4.1R蛋白表达与Sertoli细胞增殖间的相关性。少精症小鼠模型研究结果:western blotting检测显示epb41基因在正常C57BL/6J小鼠睾丸内表达135k D和80k D两种亚型。即4.1R-135k D蛋白和4.1R-80k D蛋白。与对照相比较,少精症模型小鼠睾丸内4.1R-135k D蛋白表达显着下降（P<0.05）,4.1R-80k D蛋白表达无显着变化;epb41m RNA表达降低,差异不显着;4.1R蛋白在少精症模型小鼠睾丸Sertoli细胞膜上表达下降,而各级生精细胞细胞膜上的表达则无显着差异。少精症模型小鼠血睾屏障受损,FITC从基底室进入近腔室并分散其中。与对照组相比较,少精症模型小鼠睾丸内β-catenin蛋白表达显着下降,而E-cadherin表达增加。血睾屏障相关蛋白ZO-1表达显着下降（P<0.05）,occludin和claudin-11表达均下降;Wnt/β-catenin信号通路组分Wnt3a、β-catenin表达显着下降（P<0.05）,GSK3β、c-myc和CDK4表达也下降,但差异不显着。（2）以小鼠epb41基因第3外显子为模板,设计2对sg RNAs并构建p GL3-U6-epb41-sg RNAa-puromycin和p Sp Cas9（BB）-epb41-sg RNAb-2A-GFP重组质粒载体。转染N2a细胞,验证第3外显子基因序列与4.1R蛋白亚型表达之间的相关性。以小鼠epb41基因为模板构建LV-Epb41（43286-1）过表达慢病毒载体和LV-Epb41-sg RNA（05765-1）基因敲除慢病毒载体,分别转染TM4细胞（正常小鼠睾丸支持细胞系,即Sertoli细胞）和原代Sertoli细胞。检测细胞中4.1R蛋白、血睾屏障相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路组分表达水平,阐述4.1R蛋白在体外培养Sertoli细胞增殖和连接中的作用机制。研究结果显示:重组质粒载体转染的N2a细胞中4.1R-135k D蛋白不再表达,而4.1R-80k D蛋白正常表达。LV-Epb41-sg RNA（05765-1）慢病毒载体转染TM4细胞和原代Sertoli细胞,4.1R-135k D蛋白被抑制表达,而4.1R-80k D蛋白正常表达。LV-Epb41（43286-1）过表达慢病毒载体转染TM4细胞和原代Sertoli细胞,显着提高4.1R-135k D蛋白（P<0.05）和4.1R-80k D蛋白的表达,证实已成功实现Sertoli细胞内4.1R-135k D蛋白的抑制表达和过表达。4.1R-135k D蛋白基因敲除的TM4细胞中血睾屏障相关蛋白β-catenin、E-cadherin和ZO-1表达均显着下降;Wnt/β-catenin信号通路组分WB检测结果显示:蛋白Wnt3a、β-catenin、c-myc、GSK3β和Cyclin D1均显着下降（P<0.05）,CDK4表达也下降,CDK6表达则上升。4.1R-135k D蛋白过表达TM4细胞中β-catenin、ZO-1和occludin表达均上升,E-cadherin表达下降,差异均不显着;Wnt/β-catenin信号通路组分WB检测结果显示:蛋白Wnt3a,β-catenin,c-myc,GSK3β和Cyclin D1表达均上升,CDK4和CDK6表达则下降,差异均不显着。4.1R-135k D蛋白基因敲除原代Sertoli细胞中,血睾屏障相关蛋白β-catenin、ZO-1和occludin表达均显着下降;Wnt/β-catenin信号通路组分WB检测结果显示:蛋白Wnt3a、β-catenin和CDK4均显着下降（P<0.05）,c-myc和GSK3β表达也下降,Cyclin D1和CDK6表达则上升。4.1R-135k D蛋白过表达原代Sertoli细胞中β-catenin,ZO-1和occludin表达上升,E-cadherin表达下降,差异均不显着;Wnt/β-catenin信号通路组分蛋白Wnt3a,β-catenin,c-myc,GSK3β,CDK4和CDK6表达均上升,Cyclin D1表达则下降,差异均不显着。（3）以7周龄雄性C57BL/6J小鼠为实验对象,将p GL3-U6-epb41-sg RNAa-puromycin和p Sp Cas9（BB）-epb41-sg RNAb-2A-GFP质粒载体及LV-Epb41（43286-1）载体分别通过活体原位电穿孔转染法和慢病毒载体注射法作用于小鼠睾丸,比较两种载体转染方法的蛋白表达效率和靶向性,并利用免疫荧光法检测载体处理后睾丸组织中4.1R蛋白及血睾屏障相关蛋白的表达水平。阐述4.1R蛋白在活体水平对Sertoli细胞连接的调节作用与机制。质粒载体和慢病毒载体睾丸活体转染结果显示:质粒载体电转染法比慢病毒载体注射法更快在活体内表达,即质粒载体转染后3天,即在睾丸组织中高效表达,使Sertoli细胞中4.1R蛋白表达降低。慢病毒载体注射法表达相对较慢,注射后5天才可以在睾丸中表达。过表达慢病毒载体可显着提高4.1R蛋白在Sertoli细胞中的表达。4.1R-135k D蛋白基因敲除载体作用于活体睾丸,BTB相关蛋白表达变化规律与少精症模型小鼠中的变化规律相同。4.1R-135k D蛋白过表达载体作用于睾丸活体,显着提高BTB相关蛋白的表达,E-cadherin表达除外。综上得出结论:（1）小鼠睾丸和Sertoli细胞中均表达4.1R-135k D和4.1R-80k D两种4.1R蛋白亚型,4.1R-135k D蛋白表达下降与精子细胞数量显着减少相关。（2）小鼠Sertoli细胞系中4.1R-135k D蛋白表达下降,引起β-catenin表达下降,从而使Wnt/β-catenin信号通路组分表达异常,抑制睾丸支持细胞增殖。（3）成年小鼠睾丸组织Sertoli细胞中4.1R-135k D蛋白表达下降,引起血睾屏障相关蛋白表达异常,导致细胞连接异常,精子细胞形成的微环境受损。因此,由于Sertoli细胞中4.1R-135k D蛋白表达下降,可引起Sertoli细胞数量减少或血睾屏障受损,导致精子数量显着减少。
刘鑫[2]（2021）在《知柏地黄丸联合阿仑膦酸钠片治疗原发性骨质疏松症（肝肾阴虚证）的临床研究》文中研究指明目的:观察单独服用阿仑膦酸钠片和服用知柏地黄丸联合阿仑膦酸钠片治疗原发性骨质疏松症（肝肾阴虚证）的临床疗效及安全性,进一步发挥中医药通过“多成分、多途径和多目标”治疗该病的特色与优势,为临床应用和推广提供系统而科学的理论指导。方法:本研究纳入2019年12月至2020年12月在湖南省中医院骨科门诊就诊,并辨证为肝肾阴虚证的原发性骨质疏松症患者共60例。将病例分为治疗组和对照组,每组各30例,治疗组服用知柏地黄丸和阿仑膦酸钠片,而对照组仅服用后者。两组患者均服用钙片作为基础治疗,治疗时间为3个月,即1个疗程。观察比较两组患者治疗前后视觉模拟疼痛评分（VAS评分）、骨密度、骨代谢指标（Ca、P、ALP）、中医证候积分、临床疗效及安全性指标。结果:在持续治疗1个疗程后,对照组和治疗组显着下降的指标为VAS评分（P<0.05）,相比较对照组,在缓解患者疼痛方面,治疗组效果更明显,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后无显着差异的指标为骨代谢和骨密度（P>0.05）。治疗后两组的中医证候积分都明显降低（P<0.05）,相比较对照组,在改善患者临床症状方面,治疗组效果更明显,差异有统计学意义（P<0.05）。比较分析两组临床有效率,治疗组为93.33%,对照组为83.33%,相比较对照组,在提高患者临床疗效方面,治疗组效果更明显,差异有统计学意义（P<0.05）。两组各项安全性指标均在正常范围内,未发生严重不良事件。结论:知柏地黄丸联合阿仑膦酸钠片在改善原发性骨质疏松症（肝肾阴虚证）患者临床症状、缓解疼痛及提高临床疗效方面优于单纯使用阿仑膦酸钠片,但短期内对于患者腰椎骨密度及骨代谢指标（Ca、P及ALP）无显着影响;此次临床研究未发生任何不良事件,值得进一步应用及推广。
樊金卿[3]（2017）在《补肾生精方对腺嘌呤诱导的肾阳虚型少弱精大鼠模型作用机制的实验研究》文中研究指明目的:通过观察补肾生精方对少弱精大鼠模型睾丸、附睾组织质量、精液质量、血清性激素水平及转化生长因子-β超家族的细胞内信号内转导分子Smad1、Smad4基因在大鼠睾丸中表达的影响,探讨补肾生精方对腺嘌呤诱导的肾阳虚型少弱精大鼠模型作用机制,为临床治疗提供有效的科学依据。方法:将120只成熟的12周龄的SD雄性大鼠适用性饲养一周后,将其随机分为模型组、空白组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、西药对照组共6组,每组各20只。将腺嘌呤配成浓度为500mg/mL的混悬液,除空白组大鼠给予生理盐水灌胃外,其余各组均给予腺嘌呤进行灌胃,每日灌胃1次,共灌胃28天,造成肾阳虚型少弱精子症大鼠模型,每组取出2只大鼠,用免疫组化法检测睾丸及附睾组织造模是否成功。造模成功后,高、中、低剂量组分别给予不同剂量的补肾生精方灌胃治疗,灌胃剂量分别为高剂量组为5.52g/100g体重、中剂量组为2.76g/100g体重、低剂量组为1.38g/100g体重,而模型组和空白组每日均给予1mL/100g体重的生理盐水灌胃,西药对照组每日给予10ml/kg体重的左卡尼汀注射液灌胃,每组均连续灌胃28天。实验过程中观察大鼠一般状态（如毛色、活动、体态等）,测日饮水量及进食量。实验结束后将大鼠全部处死,股动脉取血、分离血清、摘取睾丸、性腺及附属性腺称重,提取附睾精液。采用计算机辅助精子质量分析系统检测大鼠的精子密度、精子活动率、前向运动精子百分率;检测大鼠的体重、睾丸及附睾的质量;免疫组化法（SABC法）检测大鼠睾丸中Smad 1、Smad 4的水平;采用放免法检测各组大鼠的血清性腺激素睾酮（T）及黄体生成素（LH）水平、卵泡刺激素（FSH）;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠睾丸中Smad 1、Smad 4的定位和分布;Western Blot检测大鼠睾丸中Smad 1、Smad 4的水平及采用酶免法检测大鼠血清肝肾功能。结果:1.精子计数和精子活动力检测结果比较 空白组与模型组相比,差异显着具有统计学意义（P<0.05）,与模型组相比,高剂量组、中剂量组、低剂量组、西药对照组各药物治疗组精子计数和精子活动力显着提高,差异显着具有统计学意义（P<0.05）,高剂量组精子计数和精子活动力明显高于中剂量组、低剂量组、西药对照组,差异显着具有统计学意义（P<0.05）,而中剂量组与西药对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）2.补肾生精方对肾阳虚型大鼠性腺及附属性腺组织的影响 与空白组相比,其他各组大鼠体重均明显下降,差异显着具有统计学意义（P<0.05）,与模型组相比,高剂量组、中剂量组、西药对照组明显增高,差异显着具有统计学意义（P<0.05）,低剂量组与模型组相比无明显差异（P>0.05）,中剂量组与西药对照组相比无明显差异（P>0.05）。与空白组相比,各组大鼠睾丸湿重与附睾湿重均降低,差异显着具有统计学意义（P<0.05）,与模型组相比,高剂量组、中剂量组、西药对照组大鼠睾丸湿重与附睾湿重均升高,差异显着具有统计学意义（P<0.05）,低剂量组与模型组相比无明显差异（P>0.05）,中剂量组与西药对照组相比无明显差异（P>0.05）。3.免疫组化发检测各种Smad1、Smad4表达情况空白组及模型组中Smad1、Smad4在大鼠睾丸的各级生精细胞中均有表达,Smad1免疫反应阳性物质位于细胞质内,细胞核内为阴性,间质细胞及支持细胞均未见阳性表达;Smad4免疫反应阳性物质位于细胞核内,细胞质内为阴性,支持细胞、间质细胞及其他各级生精细胞均未见阳性表达。与模型组相比,其余各组Samd1的表达明显降低,差异显着,具有统计学意义（P<0.05）,高剂量组Samd1的表达明显低于中剂量组、低剂量组、西药对照组,差异显着具有统计学意义（P<0.05）,而中剂量组与西药对照组差异无统计学意义（P>0.05）;与模型组相比,其余各组Samd4的表达明显升高,差异显着,具有统计学意义（P<0.05）,高剂量组Samd4的表达明显高于中剂量组、低剂量组、西药对照组,差异显着具有统计学意义（P<0.05）,而中剂量组与西药对照组差异无统计学意义（P>0.05）,4.各组动物血清中性激素水平检测比较分析 模型组中血清睾酮（T）水平降低,LH、FSH水平升高;而高、中、低剂量组血清睾酮（T）水平升高,LH、FSH水平降低,且高剂量组明显优于中、低剂量组,差异显着具有统计学意义（P<0.05）;与模型组相比,其余各组血清睾酮（T）水平,LH、FSH水平均有显着性差异,具有统计学意义（P<0.05）。5.各组大鼠睾丸中Smad1、Smad4mRNA半定量RT-PCR表达情况 在各组大鼠睾丸中,均可见到Smad1、Smad4的mRNA表达,其中在模型组中Smad1的mRNA表达被抑制,Smad4的mRNA表达上调,而自拟补肾生精方高剂量组中Smad 1的mRNA表达被上调,Smad4的mRNA的表法被抑制。6.酶免疫法检测肾脏功能情况 通过解剖观察各组大鼠肾脏组织外观、病理组织学检查及超微结构进行观察均无明显改变,且血清检查亦无明显改变,说明自拟补肾生精方治疗肾阳虚型少弱精不育大鼠安全可靠,无明显不良反应。结论:1.补肾生精方能够有效增加精液密度,有效提高精子的活率及活力,并通过调节睾酮的分泌,增加睾丸及附属性腺的质量,使生精环境得到改善。2.补肾生精方能够促进大鼠生长代谢以及大鼠睾丸及附睾组织的发育。3.补肾生精方治疗后能促进下丘脑-垂体分泌和调节促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）释放,提高睾酮（T）浓度,降低雌二醇（E2）含量,调节下丘脑-垂体-睾丸轴功能,改善性腺轴的功能紊乱。4.补肾生精方通过调控大鼠睾丸中TGF-β超家族的细胞内信号转导分子Smads基因的表达,其可明显增加Smad1在肾阳虚型少弱精大鼠睾丸中的表达,降低Smad4在肾阳虚型少弱精大鼠睾丸中的表达,且能够上调Smad1的mRNA表达,抑制Smad4的mRNA的表达,说明Smads在肾阳虚型少弱精大鼠模型中起到了重要的作用,直接或间接促进精子的生成。5.通过酶免疫法检测各组大鼠血清中肾功能均无显着变化,证明补肾生精方治疗肾阳虚型少弱精不育大鼠安全可靠,无明显不良反应。
莫颖茵,谭桂云,杨俊雯,沈瑞扬[4]（2016）在《针药联合治疗肾虚肝郁型卵巢功能低下60例临床研究》文中研究指明目的观察针药联合治疗肾虚肝郁型卵巢功能低下患者的治疗效果。方法选择2014年10月至2015年9月在荔湾区中医院诊断为肾虚肝郁型卵巢功能低下患者60例,随机分为针药组和对照组,每组30例。针药组患者给予口服补肾调肝合剂联合针灸治疗,对照组给予口服补肾调肝合剂,两组均以3个月为1个疗程,观察2个疗程后两组患者取得的疗效。结果治疗后两组患者的全身症状、症状积分均明显改善,两组患者血清卵泡刺激素（FSH）、血清雌二醇（E2）水平明显下降（P<0.05）、抗苗勒氏管激素（AMH）水平明显升高（P<0.05）;且针药组的有效率、妊娠率、疗程及血清FSH、AMH改善情况明显优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论补肾调肝合剂联合针灸能缩短疗程,明显减轻卵巢功能低下患者的身心痛苦,降低了血清卵泡刺激素水平,提高卵巢储备功能及临床妊娠率。
郑燕飞[5]（2014）在《黄精赞育胶囊化学成分及改善少弱精子症的作用机制研究》文中进行了进一步梳理男性不育症是男科学目前研究的热点和难点,据报道少弱精子症在男性不育症中占了约3/4比例。导师王琦教授在此方面积累了丰富的临床经验,提出“肾虚夹湿热瘀毒虫”是少弱精子症的核心病机,并研制了我国第一个治疗男性不育症的生精方药——黄精赞育胶囊应用于临床,取得了良好的疗效。黄精赞育胶囊由黄精、制首乌、菟丝子、枸杞子、五味子、淫羊藿、丹参、蒲公英等20味中药组成,成分众多复杂,药理作用具有多靶点性,目前尚未对其整体的药效机理形成全面的认识,为此我们迫切需要有效的研究思路和方法来对其药效物质基础进行研究,并在此基础上分析其有效成分、药效及作用机理,确定真正的药效物质基础,指导临床安全、合理地用药,并可以有的放矢地提高其制剂水平。论文分文献综述和实验研究两大部分。文献综述系统总结了近年来中医对男性不育症的研究进展,从文献检索、实验研究、临床研究等方面探讨了方药作用机理、病因病机、辨证分型等认识；从现代医学角度探讨了睾丸生精调控及其影响因素,从睾丸生精功能的激素调控、睾丸生精功能的免疫调控、睾丸生精功能的药理性调控、睾丸生精功能的基因调控等方面进行了概述,尤其探讨了细胞凋亡对睾丸生精功能的调控机制。并且回顾了黄精赞育胶囊的临床与实验研究情况,为本课题研究做进一步铺垫。实验研究共分为8个部分。目的：通过体外化学成分及体内药物血清移行组分分析,建立黄精赞育胶囊体外化学成分HPLC的测定方法、MSn的测定方法,获取黄精赞育胶囊化学成分及体内移行成分,为质控研究提供依据,为药效机制研究奠定基础。建立少弱精子症大鼠模型,探讨黄精赞育胶囊干预模型大鼠的精液质量、内分泌激素、睾丸病理形态学及超微结构、凋亡相关因子Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白及mRNA表达的变化,以及睾丸基因表达谱的改变等。为黄精赞育胶囊的药效物质基础和分子作用机制研究提供支撑,并为黄精赞育胶囊的组方用药及作用机制提供科学内涵。方法：采用高效液相色谱技术及高分辨质谱技术等有效手段,对黄精赞育胶囊体外所含成分以及含药血清中药源性成分进行了全面的辨识。建立环磷酰胺诱导的少弱精子症模型,采用精液分析、ELISA、光镜、电镜、Western Blot、RT-PCR、基因芯片、MTT等方法,对正常组、模型组、黄精赞育胶囊高中低剂量组、五子衍宗丸对照组、左卡尼汀对照组进行精液质量、性激素（FSH、LH、T、E2、PRL）、睾丸组织形态学及超微结构、凋亡相关因子Bcl-2、Bax以及Caspase3表达,对睾丸组织基因芯片差异表达基因进行筛选和分析,并将黄精赞育胶囊中筛选出的活性成分五味子甲素应用MTT法检测对睾丸间质细胞活力的影响。结果：1.建立了黄精赞育胶囊体外1000多种化学成分数据库,结合高分辨质谱及标准品对照分析,首次发现了补肾益精中以枸杞为代表的甜菜碱,以淫羊藿为代表的淫羊藿苷A、淫羊藿昔B、淫羊藿昔C、脱水淫羊藿素-3-O-α-L-鼠李糖基-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、巫山淫羊藿黄酮苷、2"-O-鼠李糖淫羊藿黄酮次苷Ⅱ、脱水淫羊藿素3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-α-L-吡喃鼠李糖苷及宝藿苷Ⅰ,以五味子为代表的五味子甲素、戈米辛D、戈米辛J、表戈米辛O、戈米辛O、前戈米辛、前五味子素、五味子酯丁、戈米辛C、戈米辛G、伪-γ-五味子素及五味子素C,以肉苁蓉为代表的玉叶金花酸,以续断为代表的獐牙菜苷与木通皂苷D；发现了活血化瘀中以丹参为代表的丹参酮Ⅱa、异丹参酮Ⅱa、隐丹参酮及异欧前胡素,以当归为代表的茴芹内酯和欧芹酚-7-甲醚；发现了清热利湿解毒中以败酱草为代表的马钱素,以车前子、蒲公英为代表的芹菜素-7-O-葡萄糖苷。因此,从化学成分角度揭示了黄精赞育胶囊围绕“肾虚夹湿热瘀毒虫”核心病机治疗少弱精子症的科学性。2.黄精赞育胶囊血清有效活性组分共发现7个,分别为獐牙菜苷（续断）、戈米辛D（五味子）、异欧前胡素（丹参）、戈米辛C（五味子）、戈米辛G（五味子）、五味子甲素（五味子）、伪-γ-五味子素（五味子）,为黄精赞育胶囊质量控制的指标选择提供依据。3.通过观察大鼠一般状况、睾丸、附睾指数、精液常规、睾丸病理形态学及超微结构的改变等,表明CP复制少弱精子症模型大鼠成功。4.CP造模可导致大鼠精子活力下降、数量减少,黄精赞育胶囊可明显提高大鼠精子活力（P<0.05）,增加精子密度（P<0.05）,从而改善模型大鼠精子质量。5.CP诱导的模型大鼠出现了下丘脑-垂体-性腺轴功能紊乱,黄精赞育胶囊可提高血清T水平,降低E2水平,并调整FSH、TH水平,使异常性激素水平得以回复,从而改善睾丸的生精功能。6.筛选出正常组和模型组间差异表达基因共1241个,其中上调基因739个,下调基因502个；筛选出黄精赞育胶囊组和模型组间差异表达基因共774个,其中上调基因420个,下调基因354个。差异表达基因主要分布于细胞凋亡通路、细胞粘附分子信号通路、神经营养因子信号通路、嗅觉转导通路、甾体激素生物合成通路、代谢通路、视黄醇代谢通路、花生四烯酸代谢通路等8个信号通路。并通过mas3.0系统分析,找到了六个新的关键基因Adam7、Lcn5、Slc7a8、Hoxa10、Slc4a9、Vom2r57,为下一步实验做好铺垫。7.CP诱导的模型组大鼠睾丸组织Bcl-2蛋白及mRNA表达下降,Bax、Caspase3蛋白及mRNA表达上升,说明CP可通过细胞凋亡引起睾丸生精功能障碍,从而导致少弱精子症的发生。黄精赞育胶囊可使大鼠睾丸组织Bcl-2蛋白及mRNA表达明显上升,Bax、Caspase3蛋白及mRNA表达明显下降。8.黄精赞育胶囊中筛选出的活性成分五味子甲素10μmol/L浓度可显着促进睾丸间质细胞增殖（P<0.05）,而在≥50μmol/L则对睾丸间质细胞增殖活性有明显抑制作用。结论：黄精赞育胶囊体外首次发现了32个化学成分,血清有效活性成分共发现7个,初步解析了黄精赞育胶囊治疗男性不育症核心病机的科学性。黄精赞育胶囊可明显提高精子活力和数量,改善睾丸组织形态及超微结构,促进性腺轴功能恢复。筛选出NS组和CP组间差异表达基因共1241个,其中上调基因739个,下调基因502个;HJZYC组和CP组间差异表达基因共774个,其中上调基因420个,下调基因354个。这些差异基因通过细胞凋亡、细胞粘附分子信号通路、嗅觉转导通路等8条通路参与睾丸生精功能的调控,达到改善模型大鼠精子质量的作用。黄精赞育胶囊可通过提高凋亡抑制基因Bcl-2蛋白及mRNA表达,降低促凋亡基因Bax蛋白及mRNA表达来抑制生精细胞的凋亡,降低公共凋亡效应因子Caspase-3活性,从而抑制睾丸生精细胞凋亡,促进精子的生成,提高精液质量,其改善作用可能与黄精赞育胶囊中的活性成分五味子甲素有一定相关性。
张金锋[6]（2014）在《海马补肾壮阳丸对特发性弱精子症精液质量及精子功能的影响》文中进行了进一步梳理目的：通过临床观察海马补肾壮阳丸对特发性弱精子症患者治疗前后精子质量、精子功能的变化，并与对照组（维生素E胶丸联合三磷酸腺苷二钠片组）治疗后各参数比较，对其临床疗效出客观评价。方法：本研究将符合纳入标准的80例特发性弱精子症患者，按就诊次序采用随机数字表法随机分为2组：治疗组（海马补肾壮阳丸组）40例，对照组（维生素E胶丸联合三磷酸腺苷二钠片组）40例。以患者首次就诊当天作为治疗及观察的起始日期，3个月后分别记录两组治疗前后患者精液质量主要参数及精子功能检查（低渗肿胀试验、精子核DNA完整性检测、精子顶体酶活性）的结果，并以此次治疗后结果作为最终治疗结果。相关实验室检查由河南省中医院生殖医学科生殖实验室专人负责。结果：海马补肾壮阳丸组治疗特发性弱精子症的总有效率为92.50％，维生素E胶丸联合三磷酸腺苷二钠片组总有效率为70.00％，经2分析，两组总有效率差异有统计学意义（P＜0.05）；临床疗效结果，两组痊愈、显效、有效、无效例数分别为8例、23例、6例、3例和5例、15例、8例、12例，经Ridit分析，两组临床疗效差异有统计学意义（P＜0.05），治疗组优于对照组；经统计分析，两组治疗前后精液量差异无显着统计学意义（P＞0.05），低渗肿胀实验（HOS）、精子DNA完整性检测（DFI）、精子顶体酶活性、精子密度、精子活力、精子活动率及精子畸形率差异有显着统计学意义（P＜0.01）。经统计分析，组间比较，两组治疗后精液量及精子密度差异无显着统计学意义（P＞0.05）；两组治疗后低渗肿胀实验（HOS）、精子DNA完整性检测（DFI）、精子顶体酶活性、精子活力、精子活动率及精子畸形率差异有统计学意义，其中低渗肿胀实验（HOS）、精子顶体酶活性、精子活力、精子畸形率差异有显着统计学意义（P＜0.01）。结论：治疗组总有效率、临床疗效均优于对照组，海马补肾壮阳丸可以有效提高命门火衰型特发性弱精子症患者精子的活动力、活动率，并可有效降低精子的畸形率，改善患者的精子功能。
郭柏铭[7]（2014）在《氧化应激对间充质干细胞老化的作用及补肾法的调控》文中研究指明背景：骨质疏松症（Osteoporosis, OP）是一种多种因素引起、发病率最高的骨代谢疾病,与机体衰老关系尤为密切。随着我国迅速步入老龄化社会,有越来越多的人面临着骨质疏松的问题,不仅严重影响着人们的生活质量,同时也造成了巨大的经济和社会负担,所以骨质疏松疾病的防治形势日益严峻。据统计,在60岁以上的人群之中骨质疏松发病率为56%,其中女性发病率高达60%-70%。在我国骨质疏松症已跃居最常见的慢性疾病第四位。目前,骨质疏松发病越来越趋向于年轻化。随着人体的老化,机体相关机能逐渐退化,同时也打破了机体抗氧化系统的平衡,激化了机体内氧化应激状态,从而引起一系列疾病的发生。氧化应激（Oxidative Stress, OS）是引起机体衰老的一个主要原因,当机体处于一个缺血缺氧的环境中,则会引起活性氧（Reactive Oxygen Species ROS）的大量释放,体内的活性氧的积累可以引起细胞的衰老、凋亡以及组织损伤等。机体老化可导致间充质干细胞（Mesenchymal stem cells, MSCs）功能减退,使其成骨分化能力减弱,更趋向于分化为脂肪细胞而不是成骨细胞,导致年龄相关性骨丢失。这一改变与骨髓内微环境以及氧化应激密切相关。因此探索机体氧化应激对人骨髓间充质干细胞的衰老作用机制,改善机体的氧化应激状态,并找到可促进MSCs成骨分化,抑制细胞脂化是防治骨质疏松的新途径之一。目的：首先,建立过氧化氢诱导大鼠MSCs氧化应激损伤模型,模拟骨髓微环境中MSCs功能病理变化,探究H202对MSCs氧化损伤衰老的相关作用机制。其次,采用三种补肾方药（健骨二仙丸、六味地黄丸、金匮肾气丸）含药血清干预MSCs衰老模型,探索其补肾方药抑制MSCs衰老的作用机理。最后,明确三种补肾方药对改善衰老MSCs代谢活力和抑制MSCs衰老效果更显着。方法：1.MSCs体外细胞培养采用全骨髓体壁培养方法,颈椎脱臼法处死大鼠,在无菌下取出股骨与胫骨,用L-DMEM完全培养基将骨髓冲出,接种于细胞培养瓶中。取P3、4MSCs状态最好,活力最强时,收获细胞应用于实验,采用细胞活力分析仪法绘制出MSCs生长曲线。2. MSCs氧化应激衰老模型的建立采用H2O2为诱导剂诱导MSCs。取P3、4MSCs铺种于96孔板,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度H2O2（100、200、300、400、500、600、700、800、100μmol·L-1）作用MSCs不同时间（2、12、24、48h）细胞的吸光度值,与空白对照组比较,观察不同浓度、不同时间H202对MSCs增殖抑制作用,选择适合的造模时间及浓度用于后续实验。β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）检测MSCs衰老,以确定氧化衰老模型的成功建立。3.三种补肾方药含药血清对氧化应激衰老MSCs代谢活力的影响结合H2O2诱导MSCs氧化衰老模型实验结果,三种补肾方药以低、中、高剂量（5%、10%、20%）作用衰老MSCs不同时间（24、48、72h）。采用MTT法检测三种补肾补肾方药含药血清对衰老的MSCs代谢活力的影响。4.三种补肾方药含药血清对氧化应激衰老MSCs凋亡的影响采用流式细胞仪分析三种补肾方药以10%含药血清作用于MSCs氧化应激衰老模型24h后细胞凋亡情况。5.三种补肾方药含药血清对氧化应激衰老MSCs的衰老相关基因p16INK4、p21CIPIp53表达水平的影响采用反转录荧光定量技术（RT-q real-time PCR）检测三种补肾中药以10%含药血清作用于MSCs氧化应激衰老模型24h后,对衰老相关基因p16INK4、p21CIPI、p53表达水平的影响。结果：1. MSCs培养及衰老细胞形态变化生长状态良好的MCSs,呈纤维状,旋涡式生长。H2O2处理后的MSCs,细胞出现体积稍大,细胞扁平,核变大等一系列衰老征象。2.H2O2刺激MSCs氧化衰老模型建立经四甲基偶氮唑蓝（MTT）法结果分析显示：H2O2浓度为500μmol·L-1作用于MSCs24h后,细胞存活率降至约70%（p<0.05）,β-半乳糖苷酶染色阳性细胞达到约90%以上（p<0.01）,证实MSCs为衰老细胞。3.三种补肾方药含药血清浓度为5%处理氧化衰老的MSCs24h、48h、72h后,与模型组相比,在作用24h和48h后,差异具有统计学意义（P<0.05）。而在作用72h后差异无统计学意义（P>0.05）;药物浓度为10%时,作用24h后,各组与模型组比较,三种补肾方药均可刺激MSCs增殖,差异均具有统计学意义（P<0.05）。作用48h后,与模型组比较,除健骨二仙丸外,其余差异均具有统计学意义（P<0.05）；药物浓度为20%时,六味地黄丸组与金匮肾气丸可促进衰老的MSCs增殖（P<0.05）,而随作用时间的延长,呈现出对MSCs增殖抑制的作用（P<0.05）。4.模型组（凋亡率：69.5%±2.7%；存活率：69.5%±2.7%）与对照组（凋亡率：3.9±3.8%；存活率：95%±3.9%）比较,MSCs凋亡率显着提高（P<0.01）；健骨二仙丸组（凋亡率：17.1%±5.4%）、六味地黄丸组（凋亡率：21.3%±3.7%）、金贵肾气丸组（凋亡率：18.9%±2.9%）与模型组比较,可抑制MSCs凋亡率,差异具有统计学意义。（P<0.05）5. MSCs在过氧化氢作用24h后,与空白对照组相比,模型p16INK4、p21CIPI、p53衰老相关基因表达上调；其中,p21CIPI、p53差异具有统计学意义。（p<0.05）；与模型组对比,三种补肾中药组对p16INK4表达上调,差异无统计学意义。（p>0.05）；健骨二仙丸组、金贵肾气丸组对p21CIPI表达下调（p<0.05）,六味地黄丸组表达上调（p<0.05）：与模型组对比,三种补肾中药均对p53表达下调,差异有统计学意义。（p<0.05）结论：三种补肾方药含药血清可促进氧化衰老的MSCs代谢活力,抑制其凋亡,并通过下调衰老相关基因p21CIPI和p53的表达以抑制MSCs衰老,证实了补肾方药对改善骨髓微环境起到积极的作用。而在这个过程中,以补肾益气法和补益肾阳法效果更显着。
李海松,莫旭威,王彬,徐庭华,党进[8]（2013）在《右归胶囊治疗精液异常男性不育症60例临床观察》文中研究表明目的观察右归胶囊对肾阳亏虚型精液异常男性不育症患者精液参数及生殖内分泌激素水平的影响。方法将120例肾阳亏虚型男性不育症患者随机分为两组,每组60例,治疗组口服右归胶囊,每次1.8 g,每日3次;对照组口服左卡尼汀口服液,每次20 mL,每日1次;连续治疗12周为1个疗程。观察和比较两组之间及其治疗前后患者精液参数、生殖内分泌激素水平的变化。结果治疗组总有效率为83.33%,对照组总有效率为65.45%。治疗组配偶妊娠率为9.26%,对照组配偶妊娠率为5.45%。两组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;治疗组治疗前后精液量、精子浓度、精子总活力、前向运动精子、血浆睾酮（T）和促黄体生成激素（LH）水平比较差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论应用右归胶囊治疗肾阳亏虚型男性不育症可以有效地改善精液质量及生殖内分泌水平,具有较好的临床疗效。
王显辉,朱庆玲[9]（2011）在《黄氏嗣育丸对大鼠肾阴虚及少精症大鼠的治疗作用研究》文中研究指明目的:研究黄氏嗣育丸对大鼠肾阴虚模型的治疗作用以及少精症大鼠的生精作用。方法:采用高效液相荧光法测定睾酮含量,称重法测定相关脏器质量。结果:治疗组大鼠血清中的睾酮含量、肾脏质量、肾上腺质量以及睾丸、附睾、精囊腺、前列腺的质量,精子数量与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论:黄氏嗣育丸对大鼠肾阴虚及少精症有明显的治疗作用。
潘晓燕,李勃彤,王正朝,胡金艳,袁瑞,李质馨[10]（2011）在《中药在治疗哺乳动物生精障碍中的应用及其研究》文中指出生精障碍所致无精、少精、弱精是造成男性不育的主要原因,中药在治疗生精障碍方面有着举足轻重的作用。常用的中药药物包括单味中药和复方中药。为促进中药在临床上的使用,提高中药的治疗效果,文章就不同的中药在治疗生精障碍中的应用及其相关研究进行详细的分析与综述,旨在为其临床应用提供理论依据。
二、补肾调肝方对少精症大鼠生精作用及睾酮影响的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、补肾调肝方对少精症大鼠生精作用及睾酮影响的研究（论文提纲范文）
（1）基于睾丸支持细胞研究4.1R蛋白在少精症小鼠模型中的作用机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| SUMMARY |
| 中英文缩略词表 |
| 第一章 研究背景 |
| 1 少精症与动物模型 |
| 2 少精症与精子发生 |
| 3 4.1R蛋白与精子发生 |
| 4 血睾屏障与精子发生 |
| 5 Wnt/β-catenin信号通路与精子发生 |
| 6 研究意义与内容 |
| 7 试验方案 |
| 第二章 4.1R蛋白在少精症小鼠模型中的表达与作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料、仪器与试剂 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 仪器 |
| 2.3 试剂 |
| 3 方法 |
| 3.1 少精症小鼠模型的建立 |
| 3.2 睾丸组织中4.1R蛋白表达水平检测 |
| 3.3 睾丸组织中epb41 基因转录水平检测 |
| 3.4 睾丸组织中4.1R蛋白表达分布检测 |
| 3.5 血睾屏障功能分析 |
| 3.6 统计方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 少精症模型小鼠精子密度测定 |
| 4.2 少精症模型小鼠附睾和睾丸形态学检测 |
| 4.3 4.1R蛋白在小鼠睾丸组织中的表达 |
| 4.4 少精症小鼠睾丸中epb41 基因转录水平检测 |
| 4.5 少精症小鼠睾丸组织中4.1R蛋白表达分布 |
| 4.6 少精症模型小鼠血睾屏障功能分析 |
| 4.7 少精症模型小鼠睾丸中Wnt/β-catenin信号通路组分转录检测 |
| 4.8 少精症模型小鼠睾丸中Wnt/β-catenin信号通路组分蛋白表达 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 第三章 4.1R蛋白表达对睾丸支持细胞增殖和连接的调节作用研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料、仪器与试剂 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 仪器 |
| 2.3 试剂 |
| 3 方法 |
| 3.1 Epb41 基因CRISPR-cas9 质粒载体构建与验证 |
| 3.2 CRISPR-Cas9 慢病毒载体构建 |
| 3.3 过表达慢病毒载体的构建 |
| 3.4 TM4 细胞培养 |
| 3.5 原代睾丸支持细胞培养 |
| 3.6 Lenti-Cas9-sgRNA-EGFP慢病毒载体转染TM4 细胞 |
| 3.7 Lenti-Cas9-sgRNA-EGFP慢病毒载体转染原代睾丸支持细胞 |
| 3.8 过表达慢病毒载体转染TM4 细胞 |
| 3.9 过表达慢病毒载体转染原代睾丸支持细胞 |
| 3.10 慢病毒载体转染后TM4 细胞增殖检测 |
| 4 结果 |
| 4.1 Epb41-sg RNAs与 pGL3-U6-sg RNA-puromycin和 pSpCas9(BB)-2A-GFP载体连接 |
| 4.2 pGL3-U6-epb41-sg RNAa-puromycin和 pSpCas9(BB)-epb41-sg RNAb-2A-GFP共转染N2a细胞 |
| 4.3 Lenti-Cas9-sgRNA-EGFP 慢病毒载体检测 |
| 4.4 过表达慢病毒载体的构建与验证 |
| 4.5 慢病毒载体转染TM4 细胞 |
| 4.6 慢病毒载体转染原代睾丸支持细胞 |
| 4.7 慢病毒载体转染后TM4 细胞增殖检测 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 第四章 4.1R蛋白表达对体内睾丸支持细胞间连接的调节作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料、仪器与试剂 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 仪器 |
| 2.3 试剂 |
| 3 方法 |
| 3.1 质粒载体电转染小鼠活体睾丸组织 |
| 3.2 慢病毒载体睾丸活体转染 |
| 3.3 小鼠活体睾丸转染效果验证 |
| 4 结果 |
| 4.1 质粒载体活体电转染睾丸组织方法验证 |
| 4.2 重组CRISPR-Cas9 基因敲除质粒载体电转染睾丸 |
| 4.3 过表达慢病毒载体转染睾丸 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 1 总结 |
| 2 创新点 |
| 3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 在读期间发表论文和研究成果等 |
| 导师简介 |
| 附件 |
（2）知柏地黄丸联合阿仑膦酸钠片治疗原发性骨质疏松症（肝肾阴虚证）的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 引言 |
| 第一部分 临床研究 |
| 1. 临床资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 病例诊断标准 |
| 1.2.1 西医诊断标准 |
| 1.2.2 中医证候诊断标准 |
| 1.3 病例选择标准 |
| 1.3.1 纳入标准 |
| 1.3.2 排除标准 |
| 1.3.3 脱落标准 |
| 2. 研究方法 |
| 2.1 分组方法 |
| 2.2 治疗方法 |
| 2.2.1 基础治疗 |
| 2.2.2 治疗组 |
| 2.2.3 对照组 |
| 2.2.4 治疗疗程 |
| 3. 观察指标 |
| 3.1 一般资料及安全性指标 |
| 3.2 疼痛视觉模拟评分(VAS) |
| 3.3 骨密度 |
| 3.4 骨代谢指标 |
| 3.5 中医证候积分 |
| 3.6 观察时点 |
| 4. 疗效判定标准 |
| 5. 统计学分析 |
| 第二部分 结果与分析 |
| 1.一般资料分析 |
| 1.1 两组性别比较 |
| 1.2 两组年龄及病程比较 |
| 2. 疗效分析 |
| 2.1 两组VAS评分比较 |
| 2.2 两组骨密度比较 |
| 2.3 两组骨代谢指标比较 |
| 2.4 两组中医证候积分比较 |
| 2.5 两组临床疗效比较 |
| 3. 安全性指标观察 |
| 第三部分 讨论 |
| 1. 传统医学对于原发性骨质疏松症的认识 |
| 1.1 中医病名 |
| 1.2 中医药治疗概况 |
| 1.2.1 单味中药抗骨质疏松研究 |
| 1.2.2 传统补肾经典复方抗骨质疏松研究 |
| 1.2.3 中成药抗骨质疏松研究 |
| 1.2.4 中医其他疗法 |
| 1.3 中医药治疗原发性骨质疏松症机制探讨 |
| 1.4 “肝肾同源”学说与原发性骨质疏松症的关系 |
| 1.4.1 “肝肾同源”病因病机研究 |
| 1.4.2 “肝肾阴虚”证型研究 |
| 1.4.3 基于“肝肾同源”学说的治疗机理探讨 |
| 2. 知柏地黄丸的相关研究 |
| 2.1 组方配伍及方义 |
| 2.2 现代药理学研究 |
| 3. 现代医学对于原发性骨质疏松症的认识 |
| 3.1 骨质疏松症的概况 |
| 3.2 流行病学调查 |
| 3.3 病因病机及发病机制 |
| 3.4 药物治疗 |
| 3.4.1 骨健康基本补充剂 |
| 3.4.2 抑制骨吸收类药物 |
| 3.4.3 促进骨形成类药物 |
| 3.5 肝、肾两脏与原发性骨质疏松症的关系 |
| 4. 结果分析 |
| 5. 不足与展望 |
| 第四部分 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 临床研究病例报告表 |
| 附录A: 知情同意书 |
| 附录B: 视觉模拟疼痛评分表(VAS) |
| 附录C: 中医证候积分表 |
| 附录D: 临床观察表 |
| 附录E: 不良事件记录表 |
| 综述 补肾中药治疗原发性骨质疏松症的临床研究概况 |
| 参考文献 |
（3）补肾生精方对腺嘌呤诱导的肾阳虚型少弱精大鼠模型作用机制的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分: 文献综述 |
| 一、祖国医学对少弱精子症的文献研究 |
| 1. 少弱精子症的中医学认识源流 |
| 2. 少弱精子症的中医学病因病机 |
| 3. 少弱精子症的中医药治疗 |
| 4. 少弱精子症的针灸治疗 |
| 5. 少弱精子症的中西医结合治疗 |
| 二、现代医学对少弱精子症的文献研究 |
| 1. 少弱精子症西医诊断标准及流行病学 |
| 1.1 男性不育症与少弱精子症西医学诊断标准 |
| 1.2 少弱精子症流行病学研究 |
| 2. 少弱精子症的病因病理 |
| 3. 少弱精子症发生与TGF-β、Smad信号转导通路的关系 |
| 4. 少弱精子症的西医治疗 |
| 5. 辅助生殖技术 |
| 6. 手术治疗 |
| 7. 基因治疗 |
| 三、少弱精子症的实验研究 |
| 1、少弱精子症大鼠模型的建立 |
| 2、少弱精子症大鼠模型临床基础研究 |
| 第二部分: 实验研究 |
| 材料与方法 |
| 一、实验材料 |
| 1. 实验动物 |
| 2. 实验药物 |
| 3. 实验试剂与仪器 |
| 二、实验方法 |
| 1. 肾阳虚型少弱精子症大鼠模型制作方法 |
| 2. 造模成功的依据 |
| 3. 实验分组方法与灌胃方法 |
| 4. 实验取材方法 |
| 5. 实验检测方法 |
| 6、统计学方法 |
| 结果 |
| 1. 精子计数和精子活动力检测结果比较 |
| 2. 补肾生精方对肾阳虚型大鼠性腺及附属性腺组织的影响 |
| 2.1 补肾生精方对大鼠体重的影响 |
| 2.2 补肾生精方对大鼠睾丸及附睾湿重的影响 |
| 3. 观察各组大鼠睾丸形态学改变结果 |
| 4. 免疫组化法检测大鼠睾丸中Smad1、Smad4水平 |
| 5. 各组大鼠血清中性腺激素水平检测比较分析 |
| 6. 补肾生精方对睾丸Smad1、Smad4基因表达影响 |
| 6.1 实时荧光定量PCR溶解曲线分析 |
| 6.2 补肾生精方对Smad1、Smad4基因表达影响 |
| 6.3 Western Blot结果 |
| 7. 酶免疫法检测大鼠血清肾功能 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 1. 立题依据 |
| 2. 中医药治疗男性不育症的优势 |
| 3. 少弱精大鼠模型建立 |
| 4. 肾阳虚导致不育的现代研究 |
| 5. 补肾生精方药物组成分析 |
| 6. 补肾生精方对精子数目及精子活力的影响 |
| 7. 补肾生精方对大鼠体重及睾丸附睾质量的影响 |
| 8. 补肾生精方对大鼠下丘脑-垂体-睾丸轴功能的影响 |
| 9. 补肾生精方对Smad1、Smad4mRNA表达的影响 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 个人简历 |
（5）黄精赞育胶囊化学成分及改善少弱精子症的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要中英文缩略词 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 中医药治疗男性不育研究进展 |
| 1. 中医药治疗男性不育研究概况 |
| 2. 中医治法及方药机理探讨 |
| 3. 黄精赞育胶囊的临床与实验研究概况 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 睾丸生精调控及其影响因素的研究进展 |
| 1. 睾丸生精功能的激素调控 |
| 2. 睾丸生精功能的免疫调控 |
| 3. 睾丸生精功能的药理性调控 |
| 4. 睾丸生精功能的基因调控 |
| 5. 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 实验一 黄精赞育胶囊体外组分辨识研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 样品溶液制备 |
| 3 色谱条件 |
| 4 质谱条件 |
| 5 实验结果 |
| 6 结论 |
| 7 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 黄精赞育胶囊血清化学动态图谱研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 血清样品的制备 |
| 3 色谱条件 |
| 4 质谱条件 |
| 5 实验结果 |
| 6 结论 |
| 7 讨论 |
| 实验三 五味子甲素对睾丸间质细胞增殖活性的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 结论 |
| 6 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 黄精赞育胶囊改善少弱精子症大鼠的精子质量 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 结论 |
| 6 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验五 血清性激素检测 |
| 1 实验材料 |
| 2 检测方法 |
| 3 统计方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 结论 |
| 6 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验六 睾丸组织病理形态学及超微结构观察 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 结论 |
| 6 讨论 |
| 实验七 黄精赞育胶囊促进大鼠生精能力恢复基因表达谱研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 图像分析 |
| 4 实验结果 |
| 5 结果与分析 |
| 6 结论 |
| 7 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验八 黄精赞育胶囊对大鼠睾丸组织Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 结论 |
| 6 讨论 |
| 参考文献 |
| 本文结论 |
| 创新点 |
| 下一步工作设想 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（6）海马补肾壮阳丸对特发性弱精子症精液质量及精子功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 对象与方法 |
| 1 临床资料 |
| 2 治疗和观察方法 |
| 3 观察项目 |
| 4 主要仪器 |
| 5 试剂及操作方法 |
| 6 统计学处理 |
| 结果及分析 |
| 1 治疗后疗效比较 |
| 2 治疗前后精液质量比较 |
| 3 治疗前后精子功能比较 |
| 讨论 |
| 1 对本病的认识 |
| 2 补肾法现代研究机理探析 |
| 3 海马补肾壮阳丸方义分析 |
| 4 导师治疗特发性弱精子症学术思想 |
| 5 海马补肾壮阳丸药理机制探讨 |
| 6 研究思路的思考 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录 1 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附录 2 临床研究调查表 |
| 附录 3 在校期间论文论着 |
| 附录 4 中英文词语对照表 |
（7）氧化应激对间充质干细胞老化的作用及补肾法的调控（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 一、骨质疏松症发病机制最新认识 |
| 二、氧化应激、骨髓间充质干细胞和骨质疏松症三者之间的关系 |
| (一) 氧化应激与骨质疏松症 |
| (二) 氧化应激对间充质干细胞的影响 |
| (三) 骨质疏松症与骨髓间充质干细胞 |
| 三、骨质疏松目前治疗状况与最新药物研究进展 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 过氧化氢诱导MSCs氧化衰老模型的建立 |
| 一、材料及试剂 |
| 二、设备和仪器 |
| 三、实验动物 |
| 四、方法 |
| 五、结果 |
| 六、讨论 |
| 第二节 三种补肾中药对衰老的MSCs细胞活力代谢的影响 |
| 一、材料与试剂 |
| 二、仪器和设备 |
| 三、实验动物 |
| 四、方法 |
| 五、结果 |
| 六、讨论 |
| 第三节 三种补肾中药对氧化衰老的MSCs细胞凋亡的研究 |
| 一、材料与试剂 |
| 二、设备与仪器 |
| 三、方法 |
| 四、结果 |
| 五、讨论 |
| 第四节 三种补肾方药对氧化衰老的MSCs衰老相关基因p16~(INK4)、p21~(CIP1)、p53表达影响 |
| 一、材料与试剂 |
| 二、设备和仪器 |
| 三、方法 |
| 四、结果 |
| 五、讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在学期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（8）右归胶囊治疗精液异常男性不育症60例临床观察（论文提纲范文）
| 资料与方法 |
| 一、临床资料 |
| 1.一般资料: |
| 2.诊断标准: |
| 3.纳入病例标准: |
| 4.排除标准: |
| 5.脱落标准: |
| 二、方法 |
| 1.治疗方法: |
| 2.观察指标及方法: |
| 3.疗效判定标准: |
| 三、统计学处理 |
| 结 果 |
| 1.两组有效率比较: |
| 2.两组配偶妊娠率比较: |
| 3.两组治疗前后精液参数变化比较: |
| 4.两组治疗前后生殖内分泌激素水平比较: |
| 讨 论 |
（10）中药在治疗哺乳动物生精障碍中的应用及其研究（论文提纲范文）
| 1 传统医学与现代医学对生精障碍病因的认识 |
| 2 中药对生精障碍的影响 |
| 2.1 单味中药对生精障碍的影响 |
| 2.2 复方中药对生精障碍的影响 |
| 3 小结 |
四、补肾调肝方对少精症大鼠生精作用及睾酮影响的研究（论文参考文献）
- [1]基于睾丸支持细胞研究4.1R蛋白在少精症小鼠模型中的作用机制[D]. 李小英. 甘肃农业大学, 2021(01)
- [2]知柏地黄丸联合阿仑膦酸钠片治疗原发性骨质疏松症（肝肾阴虚证）的临床研究[D]. 刘鑫. 湖南中医药大学, 2021
- [3]补肾生精方对腺嘌呤诱导的肾阳虚型少弱精大鼠模型作用机制的实验研究[D]. 樊金卿. 黑龙江中医药大学, 2017(07)
- [4]针药联合治疗肾虚肝郁型卵巢功能低下60例临床研究[J]. 莫颖茵,谭桂云,杨俊雯,沈瑞扬. 国际医药卫生导报, 2016(12)
- [5]黄精赞育胶囊化学成分及改善少弱精子症的作用机制研究[D]. 郑燕飞. 北京中医药大学, 2014(03)
- [6]海马补肾壮阳丸对特发性弱精子症精液质量及精子功能的影响[D]. 张金锋. 河南中医学院, 2014(01)
- [7]氧化应激对间充质干细胞老化的作用及补肾法的调控[D]. 郭柏铭. 广州中医药大学, 2014(01)
- [8]右归胶囊治疗精液异常男性不育症60例临床观察[J]. 李海松,莫旭威,王彬,徐庭华,党进. 世界中西医结合杂志, 2013(08)
- [9]黄氏嗣育丸对大鼠肾阴虚及少精症大鼠的治疗作用研究[J]. 王显辉,朱庆玲. 中国药师, 2011(11)
- [10]中药在治疗哺乳动物生精障碍中的应用及其研究[J]. 潘晓燕,李勃彤,王正朝,胡金艳,袁瑞,李质馨. 时珍国医国药, 2011(08)