一、一氧化氮对精子膜功能完整性的影响（论文文献综述）
袁启龙[1]（2020）在《益肾活血饮改善肾虚血瘀证VC患者SDF及胚胎质量的随机对照研究》文中指出目的:通过前瞻性随机对照研究方法,评估益肾活血饮能否改善肾虚血瘀证精索静脉曲张（Varicocele,VC）不育患者精子DNA碎片率（Sperm DNA fragmentation,SDF）,及后续行体外受精-胚胎移植（In vitro fertilization and embryo transplantation,IVF-ET）治疗所获得的胚胎质量,并评估该方剂临床应用的安全性,以及与既往专家共识推荐干预方式相比是否存有其优势。方法:收集就诊于广东省中医院生殖医学科拟行辅助生殖技术助孕治疗的SDF异常不育症患者,常规行助孕治疗术前套餐检查,对阴囊彩超显示轻中度精索静脉曲张且精子参数符合IVF治疗方案的SDF异常患者给予中医证型辨识,挑选出肾虚血瘀证精索静脉曲张性SDF异常患者。计划纳入研究目标人群120例,根据随机数字表法分为三组,即益肾活血饮组39例（生活方式调整+益肾活血饮治疗）、维生素E组37例（生活方式调整+维生素E治疗）和空白对照组44例（生活习惯调整）。各组分别给予三个月上述干预措施,后续进入IVF-ET治疗周期,配偶取卵日男方精液采用密度梯度离心法优化处理。临床实施干预前,统计上述三组患者年龄、精液常规参数和SDF,比较三组上述指标是否存有差异,以评估治疗前三组基础值是否均一具有可比性;临床干预后,三组各自内部干预前后配对比较精液常规参数和SDF是否存有差异,评估三组干预措施是否具有临床治疗效果;临床干预后,分析三组间精液常规参数和SDF指标是否存有差异;比较三组措施干预后行IVF-ET助孕治疗获取的胚胎各阶段评估指标（受精率、卵裂率、可利用胚胎率、优质胚胎率）有无区别,并记录有无不良事件发生。通过比较上述各评估参数的变化,以分析三种干预措施的临床治疗效能是否存有差异,从而确认益肾活血饮治疗肾虚血瘀证精索静脉曲张性精子DNA碎片异常患者的临床疗效和安全性是否优于或等效于其它干预方案。结果:（1）实际纳入目标人群108例,其中益肾活血饮组36例,维生素E组35例,空白对照组37例,干预过程中益肾活血饮组脱落1例,空白对照组脱落2例;（2）患者夫妇双方年龄、不育年限、配偶获卵数、成熟卵泡数、治疗前精液常规参数和精子DNA碎片率,三组间比较均无显着差异,各组间精液治疗效果和胚胎发育潜能影响评估均具有可比性;（3）各组指标内部治疗前后配对比较,三组精子功能指标SDF较治疗前均有显着改善,z值分别为-13.105,-6.829和-6.697,差异均有统计学意义,所有P<0.001,精液常规单项和总体参数各组有不同程度改善;（4）治疗后三组间精液参数（包括SDF）比较,精液常规单项指标和精子总体参数三组间均无统计学差异,SDF存有显着差异,=3.37,P=0.038,多重比较发现中药组和空白对照组差异存在统计学差异（P=0.048）;（5）三组SDF改善率分别为62.857%、42.857%和37.143%,=5.116（P=0.077）,治愈率分别为45.714%、31.429%和31.429%,=2.062（P=0.357）,虽有差异,但均无统计学差异（P>0.05）;（6）治疗后SDF正常患者和异常患者胚胎培养室参数（受精率、正常受精率、卵裂率、可利用胚胎率和优质胚胎率）比较,可利用胚胎率（z=4.889,P<0.001）、优质胚胎率（z=6.148,P<0.001）和正常受精率（z=3.373,P=0.001）差异有统计学意义,其它指标均未见统计学差异;（7）三组间IVF治疗所获取胚胎各发育阶段参数比较,受精率、正常受精率、卵裂率、可利用胚胎率均无统计学差异,而优质胚胎率存有统计学差异（=17.233,P<0.001）,多重比较发现中药组与维生素E组和空白对照组差异均存有统计学差异（均P<0.05）,维生素E治疗组和空白对照组优质胚胎率无统计学差异。（8）三组肾虚血瘀证型改善率比较,益肾活血饮组改善率82.857%（29/35）,维生素E组57.143%（20/35）,空白对照组51.429%（18/35）,各组证型改善率存有显着差异,益肾活血饮干预组证型改善率显着优于其它两组。（9）安全性分析显示,各组干预措施均未见严重不良反应/事件发生,益肾活血饮组1例患者大便稍稀软,常规检查血常规、肝肾功各组均未见异常。结论:SDF异常可影响到胚胎的发育潜能,SDF异常患者正常受精率、可利用胚胎率和优质胚胎率偏低,针对肾虚血瘀证精索静脉曲性SDF异常患者的临床经验治疗（包括单独生活方式调整）,均可有效改善此类患者的SDF和精液常规参数,但呈现SDF参数治疗效果的差异性,相对于生活方式的调整和抗组织氧化应激反应的维生素E治疗,多环节作用效应的益肾活血饮干预可获得相对较低的SDF和较高的优质胚胎率,预示该类SDF异常患者行IVF治疗前采用合适的保守预处理存在其必要性,中医药干预在该类患者诊治方面存在其优势。
田雯[2]（2020）在《NO对冷藏桃果实品质相关的线粒体及其DNA聚合酶表达的调控作用》文中研究说明桃（Prunus persica L.）是一种典型的呼吸跃变型果实,主要表现在采后快速成熟和衰老。低温贮藏是广泛使用的果品贮藏方式,但连续低温容易引起桃果实贮藏冷害,出现组织褐变、果肉絮败等现象,且冷害果实中会产生过量ROS引起氧化损伤造成线粒体功能障碍等。一氧化氮（NO,Nitric oxide）是参与植物对生物和非生物胁迫反应的重要信号分子,对植物成熟衰老以及缓解贮藏冷害具有调控作用。因此,本试验以‘新泰红’桃果实为试验试材,分别浸泡于双蒸水（对照）、15μmol L-11 NO溶液、5μmol L-11 c-PTIO溶液（NO清除剂）中30 min,处理结束后于0°C中贮藏,从化学生物的角度研究了外源NO处理对冷藏桃果实线粒体氧化损伤以及损伤修复的调控作用,为缓解桃果实贮藏冷害、提高桃果实贮藏品质提供理论依据。主要结果如下:1、在低温贮藏期间,与CK和c-PTIO处理相比,外源NO处理能够显着延缓冷藏桃果实硬度、色差值的下降,以及可溶性固形物、相对电导率和失重率的上升。此外,外源NO处理还能够有效降低桃果实贮藏期间的呼吸速率,并延缓呼吸高峰的出现,在达到第二个呼吸高峰时,外源NO处理的桃果实呼吸速率分别为CK和c-PTIO处理的77%和52.7%,可以起到较好的保鲜作用,表明NO处理能够显着维持冷藏期间桃果实贮藏品质。2、外源NO处理能够有效地延缓冷藏桃果实线粒体ROS含量的上升,并且在第4周达到最大值,但NO处理的线粒体ROS含量仅为5μmol L-11 c-PTIO处理的70.7%,表明NO明显减轻胁迫下造成的氧化应激,此外NO处理能够显着抑制氧化损伤造成的线粒体肿胀、延缓线粒体膜电势、线粒体膜流动性以及线粒体呼吸链复合物（CⅠ-CⅣ）酶活性的下降,结果表明NO可以通过抑制ROS的积累,从而保持线粒体膜结构和功能的完整性。3、采用RT-PCR技术成功克隆了‘新泰红’桃果实PpPolⅠB基因,得到CDS区序列为3201 bp,编码1066个氨基酸。利用在线软件对PolⅠB蛋白进行生物信息学分析,预测该蛋白的分子式是C5222H8253N1495O1601S44,相对分子质量为11905.67,且为亲水性蛋白,不存在跨膜区域和信号肽区域;系统进化树分析表明,PolⅠB蛋白的氨基酸序列具有较高的保守性,与甜樱桃（Prunus avium）的PolⅠB同源性最高为97.94%。体外构建重组蛋白成功在Rosetta（DE3）中表达。4、在桃果实冷藏过程中,与CK相比,外源NO能够有效延缓mtDNA拷贝数含量的下降,维持mtDNA水平的稳定性,且NO处理能够有效的延缓桃果实内线粒体8-OHdG含量的上升和mtDNA聚合酶活性的下降。此外施用c-PTIO处理能够加速mtDNA拷贝数、mtDNA聚合酶活性的下降和线粒体8-OHdG含量的上升。在损伤修复途径中,NO处理能够显着延缓PpOGG1、PpAPE1、PpPolⅠB和PpLIG1基因表达水平的下降,从而修复受损的线粒体DNA维持线粒体功能的稳定性。
赖文[3]（2019）在《MTHFR基因多态性与公猪精液品质的相关性的研究》文中研究指明公猪精液品质直接影响母猪受胎率、产仔数及后代质量,对猪场生产性能和经济效率至关重要。有研究报道,5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）基因缺陷会引起机体同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）水平升高,诱导产生氧化应激,并导致精子发生障碍及不育,是叶酸与Hcy代谢中的重要酶,对于调节细胞内的叶酸水平、DNA合成和甲基化具有重要作用。本论文旨在建立和检测公猪精液和血浆Hcy含量、精浆过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平,研究MTHFR基因的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）与不同品种公猪精浆中的H2O2水平和MDA水平的相关关系,以期筛选公猪精子MTHFR基因的SNP位点作为早期预警公猪精液品质的生物标志,为公猪站提前淘汰劣质公猪提供理论依据。主要研究结果如下:1)公猪精子Hcy含量与液品质的关系:试验选取健康的杜洛克、长白、大白49头,根据记录的精子密度、有效精子数和精子活力将49头公猪分为精液品质优（精子活力>80%且精子畸形率<10%）和差（精子活力<70%或精子畸形率>20%）2组。其中精液品质优的公猪33头,差的16头。精液品质差的组精子密度、有效精子数和精子活力均显着低于精液品质优的组公猪（P<0.01）,而精子畸形率显着高于精液品质优的组公猪（P<0.01）。利用高效液相色谱法检测血浆和精子的Hcy水平,并分析其与公猪精液品质的关联性。结果表明,精液品质差的组公猪精子Hcy含量显着高于精液品质优的组公猪（P<0.01）,但血浆Hcy含量无显着差异（P>0.05）。2)公猪精子MTHFR基因多态性与精液品质的关系:根据公猪站记录选取采样前3个月公猪精液利用率为100%的公猪中精液品质最好（主要是精子活力高和畸形率低,精子活力>90%和精子畸形率<5%）的公猪20头,以及利用率小于60%的公猪中精液品质最差（主要是精子活力低和畸形率高,精子活力<75%和精子畸形率>15%）的公猪20头。分别采样提取精子DNA和扩增MTHFR外显子片段。然后将40头公猪各片段的PCR原液混合,通过一代测序技术,鉴定公猪精子MTHFR外显子上的SNP位点。结果表明:公猪精子MTHFR基因外显子上共存在13个SNP位点,其中两个导致编码氨基酸改变;与人的MTHFR基因的SNP位点相比,有7个位点是一致的,没有发现与人不育症相关的MTHFR 677C>T的相似位点。采集945头杜洛克公猪、459头长白和86头大白公猪的精液样品,利用高通量SNP分型技术对1490头公猪精子样品的MTHFR的基因SNP位点进行检测,并与精液量、精子密度、总精子数、有效精子数、精子活力、精子畸形率等指标进行了关联分析。结果表明:杜洛克公猪c.450C>T位点与精子活力显着相关（P<0.05）;c.294C>T位点与总精子数和有效精子数都显着相关（P<0.05）。长白公猪c.450C>T位点与精液量显着相关;c.450C>T位点与精子密度显着相关;c.1278G>A、c.1041G>A、c.570C>T和c.414C>G位点不仅与精子密度显着相关,还与精子畸形率显着相关（P<0.05）。没有发现SNP位点与大白公猪精液品质相关。对长白公猪符合哈达温伯格定律的c.1485A>G、c.1287A>G、c.1278G>A、c.1041G>A、c.570C>T、和c.414C>G的6个位点和大白公猪符合哈代温伯格定律的c.1485A>G、c.1287A>G、c.1278G>A、c.1041G>A、c.570C>T、c.450C>T、c.414C>G的7个位点进行基因连锁不平衡分析。结果表明:长白公猪精子MTHFR外显子上的6个SNP位点构成2个单倍型模块,模块1的c.1485A>G和c.1287A>G位点处于强连锁不平衡状态（D’>0.8,r2>0.33）;模块2的c.1278G>A、c.1041G>A、c.570C>T、和c.414C>G的4个SNP两两之间均处于强连锁不平衡状态（D’>0.8,r2>0.33）;大白公猪精子MTHFR外显子上的7个SNP构成1个单倍型模块,模块中的c.1485A>G、c.1287A>G、c.1278G>A、c.1041G>A、c.570C>T的5个SNP位点两两之间均处于强连锁不平衡状态（D’>0.8,r2>0.33）。3)试验选取170头长白公猪,检测了精浆中的H2O2和MDA水平,并与MTHFR基因的SNP位点进行关联性分析。结果表明:长白公猪MTHFR的c.1278G>A、c.1041G>A、c.570C>T、c.414C>G和c.294C>T位点不同基因型精浆中的H2O2水平和MDA水平存在显着性差异。综上所述,本研究主要结论如下:精液品质差组公猪精子Hcy含量显着高于精液品质优组公猪,但血浆Hcy含量无显着差异。长白公猪MTHFR c.1278G>A、c.1041G>A、c.570C>T、c.414C>G和c.294C>T位点不同基因型不仅与精液品质存在显着性差异,还与精浆中的H2O2水平和MDA水平存在显着性差异,因此这些位点的多态性可能作为潜在的预测长白公猪精液品质的生物标记。
徐曼[4]（2019）在《肉碱对冻融后猪精子生物学特性及抗氧化、抗凋亡的影响》文中研究表明自冷冻配子技术发明以来,大多数哺乳动物的冷冻精液技术得到了突飞猛进的发展,商品化效果较好。猪由于其精子抗冷冻打击能力差,冷冻精液的商品化效果不甚理想,目前多采用鲜精人工授精的方法。肉碱（Carnitine）自发现以来,因其在抗氧化方面的效果甚佳,目前多用于改善精子质量的各种药剂中,并在临床中取得了一定的效果。本试验意在探究肉碱对猪精子冻融后质量、精卵结合能力的影响,及其对精子凋亡因子Bax、Bc1-2、Caspase-3的mRNA表达水平和抗氧化酶SOD 2、CAT、GPx1的mRNA表达水平的影响。采用向冷冻液中添加不同浓度的肉碱,对精子进行冻融处理并检测鲜精及冻融后精子的各项生物学特性与脂质过氧化产物丙二醛（MDA）浓度及总抗氧化能力,以证明冻融后猪精子的质量大幅下降,及肉碱确实能够影响猪精子的冻存质量,并筛选出肉碱保护作用最强的添加浓度。对比鲜精组、无肉碱添加组及最佳浓度组的凋亡相关基因、抗氧化相关基因mRNA表达水平。用荧光染色技术对比鲜精组、无肉碱添加组及最佳浓度组的精卵结合情况。试验得到以下结果:1.冷冻液中添加不同浓度的肉碱（0、0.025、0.05、0.075 mg/ml）冻融后,各组精子活动率、质膜完整率、顶体膜完整率均低于最佳肉碱浓度组（0.05 mg/ml）,各处理组间活动率、质膜完整性差异性均显着,除0.025及0.075 mg/ml处理组外各组间顶体膜完整性均差异显着（P<0.05）。各冻融组与鲜精相比,其MDA浓度均显着增加,其中最佳浓度处理组较其他各处理组MDA浓度最低,其余各处理组间差异不显着（P<0.05）。各冻融组与鲜精相比,其总抗氧化能力均显着降低,其中最佳浓度处理组较其他各处理组总抗氧化能力最高且与各处理组差异显着,其余处理组间差异不显着（P<0.05）。证明猪精子在冻融处理后确实质量下降,且肉碱对猪精子的冻存质量存在积极影响。2.与鲜精相比,冻融后精子中促凋亡相关基因mRNA表达水平显着增加,抗凋亡相关基因mRNA表达水平显着降低,抗氧化酶相关基因mRNA表达水平显着降低（P<0.05）。与无肉碱添加组相比,最佳浓度组精子中促凋亡相关基因表达水平显着降低,抗凋亡相关基因mRNA显着增加,抗氧化酶相关基因含量显着增加（P<0.05）。3.使用鲜精、无肉碱添加组、最佳浓度组精子进行人工授精并使用荧光染色,结果显示鲜精组精子黏附数最多,最佳浓度组精子黏附数较少,无肉碱添加组精子黏附最少。结果显示,肉碱的添加可以有效降低冻融过程中精子受到的不利影响,提高精子的冻存质量。肉碱可影响精子冻存中的凋亡相关基因表达和抗氧化酶相关基因表达。肉碱可以改善冻存精子的精卵结合能力。
刘庆[5]（2016）在《日粮n-6:n-3比和维生素E对公猪繁殖力的改善及其作用机理研究》文中研究说明公猪繁殖力不仅直接决定公猪站的经济效益,而且影响规模化猪场母猪的繁殖性能。生产中精子活力低、畸形率高是公猪繁殖力降低的重要原因。日粮是影响公猪精液品质的重要因素。研究证实:日粮n-3多不饱和脂肪酸（poly unsaturated fatty acid,PUFAs）可改善公猪精液品质,而不同n-3PUFA来源、添加量及持续作用时间下日粮n-3PUFAs对公猪繁殖力的改善并不一致;且日粮n-3PUFAs会增加精子膜脂质过氧化敏感性,不利于公猪繁殖力。日粮维生素E（vitamin E,VE）常用来缓解这种脂质过氧化,但n-3PUFAs和VE的联合添加使其作用效果并不明确且不稳定。因此,本研究的目的是在研究不同日粮n-6:n-3比和VE对公猪精液品质、精子脂肪酸组成及抗氧化状态影响的基础上,筛选有利于公猪精液品质改善的日粮n-6:n-3比和VE,进一步验证这些日粮n-6:n-3比和VE对公猪精液品质及繁殖力的改善,并通过精子膜结构和功能的修饰及机体、精液中抗氧化状态的调节来探讨其可能的作用机理,为富含n-3PUFAs的原料和VE在公猪营养中的应用提供理论指导和技术支持。主要的研究内容和结果如下:第一部分研究日粮n-6:n-3比和VE对公猪精液品质、精子脂肪酸组成及抗氧化状态的影响。试验选取48头健康成熟的长白公猪,按照年龄（24.30±1.78月）和精液品质接近的原则将48头公猪随机分为6组,每组8头公猪,每头公猪1个重复,单栏饲喂。试验以玉米-豆粕为主要原料配制等能等氮基础日粮。采用3×2双因素设计,试验公猪每日饲喂2.5kg基础日粮外,再分别饲喂60g豆油、45g豆油+15g鱼油和60g鱼油,形成3个n-6:n-3比（14.4、6.6和2.2:高,中和低比率）日粮。每个比率的日粮分别添加200和400 mg/kg（低和高剂量）VE,形成6个试验组。测定第0、6、8、10、12和14周精液品质。采集0W和8W血液和精液,用于测定精子脂肪酸组成,以及机体、精子和精清中的抗氧化状态。试验结果显示:1)日粮n-6:n-3比显着改变了精子脂肪酸组成。与高比率组相比,中比率和低比率组在试验第8周均显着提高了精子二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic acid,DHA）、总n-3PUFA含量（P<0.05）,降低了精子二十二碳五烯酸（Docosapentaenoic acid,DPA）、总n-6PUFA含量和n-6:n-3比（P<0.05）;总PUFA未受日粮处理的影响（P>0.05）。2)日粮n-6:n-3比和VE显着改变了公猪血清、精子和精清抗氧化能力。试验第8周,中比率组较高比率和低比率组显着提高了精清超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD:88.2 vs 66.2、72.6 U/m L）和总抗氧化能力（Total antioxidant capacity,TAC:5.8 vs 4.7、4.7 U/m L）（P<0.05）;与高比率组相比,中比率组对精子和血清丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量无显着影响（3.1 vs 3.2 nmol/108sperm cells;2.7 vs 3.2 nmol/m L,P>0.05）;高剂量VE组较低剂量VE组显着提高了血清、精子和精清中SOD,及血清和精清中TAC（P<0.05）,同时显着降低了精子MDA（3.1 vs 3.7 nmol/108 sperm cells,P<0.05）。3)日粮n-6:n-3比和VE显着影响了公猪精子活力。在第8-14周时,中比率组显着（第8、10和14周）（P<0.05）或极显着（第12周）（P<0.01）提高了直线运动精子比例,改善了精子活力。在第8周,高剂量VE组较低剂量VE组极显着改善了直线运动精子活力（P=0.01）;在第10、12和14周时则有显着改善（P<0.05;P=0.05;P<0.05）。第二部分在第一部分试验的基础上,研究日粮n-6:n-3比和VE对公猪精子产出、精子形态特征和运动能力、常温保存后精子活力和性欲的影响。试验选取40头杜洛克公猪,按照年龄（591.5±9.2 d）、体重（272.9±47.6 kg）和精液品质接近的原则随机分为4组,每组10头公猪,每头公猪1个重复,单栏饲喂。试验以玉米-豆粕为主要原料配制等能等氮基础日粮。采用2×2双因素设计,试验公猪每日饲喂2.5kg基础日粮外,再分别饲喂60g豆油和45g豆油+15g鱼油,形成2个n-6:n-3比（14.4和6.6:高和低比率）日粮。每个比率的日粮分别添加200和400 mg/kg（低和高剂量）VE,形成4个试验组。采精时记录0、8、12和16周公猪性欲;采精后分析0、8、12、16和20周公猪精子产出、精子形态特征和精子运动能力及17oC常温保存12h、36h、72h和120h后精子活力。试验结果表明:1)0-8周时,日粮n-6:n-3比和VE对精液量、精子密度和精子数、精子形态特征和运动能力、常温保存后精子活力和性欲无显着影响（P>0.05）。2)12-20周时,与高比率组相比,低比率组显着提高了第12、16和20周直线精子活力（P<0.05）,精子直线运动速度（straight-line velocity,VSL）、平均路径速度（average path velocity,VAP）和曲线速度（curvilinear velocity,VCL）（P<0.05）;高剂量VE组较低剂量VE组显着提高了第12和20周直线精子活力、VSL和VCL（P<0.05）。3)低比率组较高比率组显着提高了第12、16和20周精子正常形态,降低了精子中部畸形（P<0.05）;高剂量VE组较低剂量VE组显着提高了第16和20周精子正常形态（P<0.05）,显着降低了第12、16和20周近端原生质滴（P<0.05）。4)日粮n-6:n-3比对第12、16和20周的常温保存后精子活力无显着影响。高剂量VE组较低剂量VE组显着提高了12周（12h和36h）和20周（12h、36h、72h和120h）常温保存后直线运动活力（P<0.05）。第三部分研究日粮n-6:n-3比和VE对公猪精子膜结构、膜功能和抗氧化状态的影响及其改善公猪繁殖力的机理。试验动物、日粮及试验设计同第二部分试验。采集试验0、8、12、16和20周血液和精液,测定精子膜结构和功能完整性、膜流动性、线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential,MMP）、活性氧水平、精子脂肪酸组成、VE含量、SOD酶活、谷胱甘肽过氧化物酶活（Glutathione peroxidase,GSH-Px）、MDA含量和8-羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OH d G）含量、精清TAC及血清和精清中SOD酶活、GSH-Px酶活和MDA含量。试验结果显示:1)日粮n-6:n-3比显着影响了公猪精子脂肪酸组成。与高比率组相比,低比率组显着提高了12周和16周精子DHA、总n-3PUFA含量（P<0.05）,降低了精子DPA、总n-6PUFA含量、DPA:DHA比和n-6:n-3比（P<0.05）。2)日粮n-6:n-3比和VE显着改变了公猪精子膜结构和功能。低比率组较高比率组显着提高了12和16周精子膜结构完整性、膜流动性（P<0.05）、12周MMP、16周膜功能完整性（P<0.05）;高剂量VE组较低剂量VE组显着提高了12和16周MMP（P<0.05）及16周精子膜结构完整性和流动性（P<0.05）。3)日粮n-6:n-3比和VE显着影响了公猪血清、精子和精清中抗氧化状态。在第12、16和20周,低比率组和高剂量VE组分别显着提高了血清SOD酶活和GSH-Px酶活及精子SOD酶活（P<0.05）,显着降低了血清MDA含量和精子8-OHd G含量（P<0.05）。高剂量VE组显着提高了精子、精清GSH-Px酶活和精清SOD酶活和TAC,降低了精子活性氧水平和精子、精清MDA含量（P<0.05）。日粮n-6:n-3比对精子VE含量无显着影响,而高剂量VE组较低剂量VE组显着提高了精子维生素E含量（P<0.05）。综上所述,本研究的结论是:1)日粮n-6:n-3比会影响公猪精液品质。当日粮n-6:n-3比为6.6时,精子活力和精子形态得到显着改善;同时在这种试验条件下,日粮维生素E水平达到400 mg/kg时有利于公猪精子活力和精子形态的改善。2)日粮n-6:n-3比为6.6时,精子脂肪酸组成改变,进而改善了精子膜结构和膜功能,改善公猪繁殖力;相应地,在这种试验条件下,日粮维生素E水平达到400 mg/kg后可提高公猪机体和精液中抗氧化能力,降低精子氧化损伤程度,从而改善公猪繁殖力。
王然,殷会莹,郭明申,刘淑卓,葛少钦[6]（2014）在《非梗阻性不育患者精子膜超微结构研究》文中研究说明目的研究非梗阻性不育患者精子膜超微结构的改变,探讨非梗阻性不育患者精子膜超微结构缺陷对男性不育的影响。方法利用透射电镜对临床非梗阻性不育患者新鲜精液标本中精子膜的超微结构进行观察。结果在电镜下,发现该不育男性患者精子多存在质膜、顶体外膜和/或顶体内膜等畸变,膜结构呈多形态超微结构异常的现象,此外,精子核、颈部和线粒体、微管等超微结构也存在病理性改变。结论精子膜超微结构畸变是非梗阻性男性不育原因之一。
王江涛[7]（2011）在《一氧化氮在人精子体外获能过程中作用的实验研究》文中研究指明目的:研究精子获能过程中一氧化氮浓度的动态变化及其相关制剂对改善精子质量的影响,探讨一氧化氮在精子获能过程中作用,为一氧化氮相关制剂改善体外人工受精精子的获能率提供理论依据。方法:依据世界卫生组织（WHO）标准进行精液常规检测结果,精液样本分为正常精液组（A组）15例精液异常组（B组）15例,所有精液样本经梯度密度离心法获得精子,加入精子培养液使之获能,37℃孵育箱孵育4小时,一氧化氮检测系统检测精子获能过程中一氧化氮浓度的变化过程。另取精液异常组（C组）10例,同样方法处理后平均分为两组对照组（C1）和实验组（C2）, C2开始检测后30分钟即予以硝普钠,观察硝普钠对精子获能过程的影响,待基线基本平稳后予以NG-甲基-L-精氨酸,并观察NG-甲基-L-精氨酸对精子获能过程及精子质量参数的影响。结果:B组较A组在开始检测到出现一氧化氮浓度急剧变化所需平均时间（T1）时间长（P<0.05）、两组在出现一氧化氮浓度急剧变化时一氧化氮的浓度（D）无明显差异（P>0.05）,B组比A组一氧化氮一定浓度下持续时间（T2）明显增长（P<0.05）,A组及B组T1与精子活率、直线运动精子数、直线运动精子活率相关（P<0.05）。A组与B组出现一氧化氮浓度急剧变化时一氧化氮浓度（D）与直线运动精子数相关（P<0.05）,A组与B组一氧化氮在一定浓度持续时间（T2）与精子活率、直线运动精子活率、d级（极慢或不动精子）精子及精子鞭打频率相关(（P<0.05）。结论:1.推测精子获能过程中不是所有的精子同时获能,绝大多数是在一定时间段内获能,少部分分布于整个获能过程中;2、精液异常组出现一氧化氮浓度急剧变化的时间及出现一氧化氮急剧变化后一氧化氮高浓度持续时间较正常精液组明显延长;3、适量浓度一氧化氮能够缩短异常组精液一氧化氮浓度出现时间,NG-甲基-L-精氨酸可以抑制精液异常组一氧化氮持续状态。
贺鹏,杨彦玲[8]（2008）在《一氧化氮和一氧化氮合酶对男性生殖系统的作用》文中研究表明一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）在男性生殖系统分布广泛,本文着重讨论NO及NOS通过调节下丘脑-垂体-性腺轴和生殖系统血液循环,影响雄性激素的分泌,影响精子的发生、成熟、活动及受精能力以及阴茎的勃起而对男性生殖能力的调节作用。
季佳佳[9]（2008）在《二硫化碳对共培养大鼠睾丸支持—生精细胞凋亡和凋亡相关蛋白表达的影响》文中研究说明二硫化碳（CS2）是一种应用广泛的有机溶剂。对男（雄）性影响的报道主要表现为性功能由亢进到减退,精子数减少,活动力下降和畸形精子数增多等。但有关CS2对男（雄）性生殖损伤作用机制的研究鲜有报道。本实验以共培养大鼠睾丸支持-生精细胞为研究对象,初步探讨CS2对大鼠睾丸细胞凋亡作用和凋亡相关蛋白表达的影响,为揭示其基因调控机制,阐明CS2生殖毒性的作用机制提供科学依据。本实验通过建立大鼠睾丸支持-生精细胞共培养体系,运用Feulgen氏核染色法对支持细胞和生精细胞进行鉴定,然后以CS2作为受试物,对共培养大鼠支持-生精细胞进行染毒,用MTT比色法检测其对共培养细胞存活率的影响。用TUNEL法检测支持细胞和生精细胞的凋亡指数,并用Western blot方法对不同浓度CS2处理过的共培养细胞P53和Bcl-2蛋白进行半定量检测,用免疫细胞化学方法对不同浓度CS2处理过的共培养细胞Fas和FasL蛋白进行定位以及粗定量。实验结果表明,本实验方法建立的大鼠睾丸支持-生精细胞共培养体系,在不添加任何细胞因子的条件下,生精细胞能够贴附于支持细胞层上生长,并在体外较长时间共生。在CS2作用下,细胞相对存活率随染毒浓度的增高而降低,当CS2浓度≥100μmol/L时,共培养的支持细胞与生精细胞相对存活率明显降低（P<0.05）。凋亡指数亦随染毒浓度的增高而增大（P<0.05和P<0.01）。P53和Bcl-2蛋白表达水平均随CS2染毒浓度增高而增高,各CS2浓度组P53蛋白表达水平均显着高于对照组（P<0.05）,100μmol/L和200μmol/L浓度组Bcl-2蛋白表达水平也显着高于对照组（P<0.05）。各CS2浓度组Fas和FasL的表达量较对照组明显增高。从以上结果可以看出:在本实验建立的体外共培养体系中,生精细胞可以贴附与支持细胞层上生长,并与之较长时间在体外共生,Feulgen氏核染色法用于鉴定支持细胞和生精细胞简单、易行,我们认为这个培养体系和鉴定方法为深入研究化学物质对支持细胞和生精细胞的生殖毒性及毒作用机制提供了细胞模型;CS2对体外共培养的支持-生精细胞具有细胞毒作用,可使细胞存活率下降,细胞凋亡率增高,最终导致精子数量减少;CS2可诱导共培养大鼠支持-生精细胞P53、Bcl-2、Fas及FasL的表达,Fas和FasL表达上调,启动Fas系统使生精细胞发生凋亡,P53的表达增高进一步促使凋亡的发生,而Bcl-2的高表达可能是为抑制凋亡的发生而产生的保护性反应。因此P53、Bcl-2和Fas系统参与了CS2诱导支持细胞和生精细胞凋亡的基因调控过程,这为进一步探讨其基因调控机制,阐明CS2致男（雄）性生殖损伤的机理,保护职业人群的健康提供了科学依据。
季佳佳,赵艳芳,陈国元[10]（2007）在《一氧化氮和一氧化氮合酶对雄性生殖系统的作用》文中提出一氧化氮（NO）是一种兼有第二信使、神经递质和效应分子等多种生理功能的生物信号分子,在生物体内发挥着十分重要的生理作用。NO的产生离不开一氧化氮合酶（NOS）,NOS广泛分布于男性生殖系统的各个器官,对生殖的调节作用具有双重性。本文就NO和NOS对雄性生殖系统的作用作一简要概述。
二、一氧化氮对精子膜功能完整性的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、一氧化氮对精子膜功能完整性的影响（论文提纲范文）
（1）益肾活血饮改善肾虚血瘀证VC患者SDF及胚胎质量的随机对照研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 精索静脉曲张性精液异常及对胚胎影响的现代医学研究进展 |
| 一、流行病学及男性生育力评价指标进展 |
| 二、精索静脉曲张与精子DNA碎片相关性研究 |
| 三、精子DNA碎片对辅助生殖技术助孕结局的影响研究 |
| 四、精索静脉曲张性精子DNA碎片率异常的西医治疗 |
| 第二节 精索静脉曲张和不育症的中医研究现状 |
| 一、中医学对精索静脉曲张的认识和研究 |
| 二、中医学对不育症的认识和研究 |
| 三、中医学对精索静脉曲张性不育症的认识和研究 |
| 四、中医学对精索静脉曲张性精子异常的治疗现状 |
| 第二章 临床研究 |
| 第一节 研究方案 |
| 一、研究背景和基础 |
| 二、研究目的 |
| 三、研究方法 |
| 四、治疗方法 |
| 五、观察指标及方法 |
| 六、研究过程质量控制 |
| 七、统计学处理 |
| 第二节 研究结果 |
| 一、一般资料和配偶获卵情况比较 |
| 二、三组治疗前各项基础指标比较 |
| 三、治疗前SDF与基线资料的相关性分析 |
| 四、三组精索静脉曲张严重程度构成比比较 |
| 五、三组治疗前后精液各参数的比较 |
| 六、三组治疗后各指标比较 |
| 七、不同干预措施对不同程度VC患者SDF的治疗效果比较 |
| 八、干预后SDF正常和异常患者胚胎质量比较 |
| 九、干预后三组IVF胚胎质量评估指标比较 |
| 十、中医证型转归 |
| 十一、安全性评价 |
| 第三节 讨论 |
| 一、本研究基础参数的均衡和干扰因素的排除 |
| 二、男性生育评估指标SDF对 IVF助孕结局的影响 |
| 三、三组干预措施改善精液常规参数和SDF不同疗效的分析 |
| 四、益肾活血饮有效性和安全性分析及资料支持 |
| 五、三组干预措施后IVF后期阶段胚胎质量存有差异 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（2）NO对冷藏桃果实品质相关的线粒体及其DNA聚合酶表达的调控作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号及缩略表(ACRONYMS AND SYMBOLS) |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 植物线粒体的生理生化功能 |
| 1.1.1 线粒体的结构特征 |
| 1.1.2 线粒体的生物学功能 |
| 1.1.3 线粒体功能障碍 |
| 1.2 植物线粒体基因组 |
| 1.2.1 植物线粒体DNA |
| 1.2.2 植物线粒体DNA氧化损伤 |
| 1.2.3 植物线粒体DNA对氧化损伤的防御机制 |
| 1.2.4 植物线粒体DNA聚合酶研究现状 |
| 1.3 冷胁迫下外源NO对植物线粒体的调控作用 |
| 1.3.1 一氧化氮与植物生理 |
| 1.3.2 一氧化氮与果实贮藏冷害 |
| 1.3.3 一氧化氮对线粒体的调控作用 |
| 1.4 课题研究目的与意义、研究内容和技术路线 |
| 1.4.1 研究目的与意义 |
| 1.4.2 技术路线 |
| 1.4.3 研究内容 |
| 第二章 外源NO对冷藏桃果实贮藏品质及线粒体功能的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料与试验设计 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器与设备 |
| 2.1.4 测定指标与方法 |
| 2.1.5 统计学分析 |
| 2.2 结果分析 |
| 2.2.1 不同处理对冷藏桃果实品质指标的影响 |
| 2.2.2 不同处理对冷藏桃果实线粒体ROS的影响 |
| 2.2.3 不同处理对冷藏桃果实线粒体肿胀度的影响 |
| 2.2.4 不同处理对冷藏桃果实线粒体膜电势的影响 |
| 2.2.5 不同处理对冷藏桃果实线粒体膜流动性的影响 |
| 2.2.6 不同处理对冷藏桃果实线粒体呼吸链复合物Ⅰ-Ⅳ活性的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 NO对冷藏桃果实贮藏品质的的影响 |
| 2.3.2 NO对冷藏桃果实线粒体功能的的影响 |
| 第三章 桃果实线粒体DNA聚合酶基因的克隆及原核表达 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料与试验设计 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 实验仪器与设备 |
| 3.1.4 主要溶液、培养基的配制 |
| 3.1.5 实验方法 |
| 3.2 结果分析 |
| 3.2.1 桃果实PolIB基因全长的获得 |
| 3.2.2 桃果实PolIB生物信息学分析 |
| 3.2.3 桃果实PolIB蛋白体外表达 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 ‘新泰红’桃果实PolⅠB基因的克隆及生物信息学分析 |
| 3.3.2 ‘新泰红’桃果实PolⅠB蛋白的原核表达 |
| 第四章 外源NO对线粒体DNA氧化损伤及碱基切除修复的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料与试验设计 |
| 4.1.2 实验试剂 |
| 4.1.3 实验仪器与设备 |
| 4.1.4 实验方法 |
| 4.1.5 数据统计方法 |
| 4.2 结果分析 |
| 4.2.1 桃果实总DNA的提取 |
| 4.2.2 目的基因琼脂糖凝胶电泳验证 |
| 4.2.3 不同处理对冷藏桃果实相对mtDNA拷贝数的影响 |
| 4.2.4 不同处理对冷藏桃果实线粒体8-OHdG含量的影响 |
| 4.2.5 不同处理对冷藏桃果实mtDNA聚合酶活性的影响 |
| 4.2.6 碱基切除修复相关基因特异性引物琼脂糖凝胶电泳验证 |
| 4.2.7 NO对冷藏桃果实碱基切除修复相关基因表达的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 NO对 mtDNA氧化损伤的影响 |
| 4.3.2 NO对 mtDNA碱基切除修复途径相关基因表达的影响 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 |
（3）MTHFR基因多态性与公猪精液品质的相关性的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 ABBREVIATION |
| 第一部分 文献综述 |
| 1 前言 |
| 2 公猪精液品质的评价 |
| 2.1 精液量 |
| 2.2 精子密度 |
| 2.3 精子活力 |
| 2.4 精子形态 |
| 3 影响精液品质的因素 |
| 3.1 品种 |
| 3.2 月龄 |
| 3.3 环境 |
| 3.4 营养 |
| 4 活性氧与精子功能 |
| 4.1 精液中ROS种类及其来源 |
| 4.2 精液氧自由基清除系统 |
| 4.3 活性氧对精子形态和功能的影响 |
| 5 机体Hcy水平与雄性生殖 |
| 5.1 机体Hcy的代谢 |
| 5.2 影响机体Hcy生成的因素 |
| 5.3 Hcy的毒性作用 |
| 5.4 Hcy诱导氧化应激 |
| 5.5 Hcy对雄性生殖的影响 |
| 6 MTHFR的基因多态性 |
| 6.1 单核苷酸基因多态性 |
| 6.2 MTHFR基因的基因多态 |
| 6.3 MTHFR的基因多态性与雄性生殖 |
| 7 研究目的与意义 |
| 第二部分 试验内容 |
| 试验一 公猪机体Hcy水平对公猪精液品质的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验动物与分组 |
| 1.2 饲养管理 |
| 1.3 试验样品的采集与制备 |
| 1.3.1 精液样品的采集 |
| 1.3.2 样品的测定方法 |
| 1.4 主要仪器与设备 |
| 1.5 主要试剂与试剂盒 |
| 1.6 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 建立高效液相色谱法检测公猪精子Hcy含量 |
| 3.2 公猪精子Hcy含量与精液品质关联分析 |
| 3 讨论 |
| 试验二 精子MTHFR基因多态性与公猪精液品质 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验样品来源 |
| 1.2 主要试剂与试剂盒 |
| 1.3 试剂的配制 |
| 1.4 精子DNA提取 |
| 1.5 PCR反应 |
| 1.6 公猪精子MTHFR基因外显子SNP的测定 |
| 1.7 单倍型和基因连锁不平衡分析 |
| 1.8 统计分析 |
| 1.9 主要分子生物学软件和分析工具 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 精子MTHFR基因多态性鉴定 |
| 2.2 不同品种公猪精子MTHFR基因多态性位点的分布频率 |
| 2.2 MTHFR基因连锁不平衡分析 |
| 2.3 公猪精子MTHFR基因多态性位点与精液品质关联分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 MTHFR基因多态性与分布频率 |
| 3.2 MTHFR基因多态性与精液品质以及雄性生殖的关系 |
| 试验三 长白公猪精子MTHFR基因多态性位点与过氧化氢和MDA含量关联分析 |
| 1 材料方法 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 长白公猪精子MTHFR基因多态性位点与过氧化氢含量 |
| 2.2 长白公猪精子MTHFR基因多态性位点与MDA含量 |
| 3 讨论 |
| 第三部分 结语 |
| 1 研究结论 |
| 2 创新点 |
| 3 本研究的不足之处 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（4）肉碱对冻融后猪精子生物学特性及抗氧化、抗凋亡的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 猪冷冻精液的研究现状 |
| 1.2 冷冻保护剂的研究进展 |
| 1.3 肉碱(CARNITINE)的研究进展 |
| 1.4 抗氧化酶 |
| 1.5 抗凋亡相关基因 |
| 1.6 本试验研究目的与意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验时间与地点 |
| 2.1.2 试验动物与材料 |
| 2.2 试验设计 |
| 2.3 试验主要试剂及仪器 |
| 2.4 试验方法 |
| 2.4.1 药品配制 |
| 2.4.2 试验过程 |
| 2.5 数据统计与分析 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 添加肉碱对精子冻融后基本质量的影响 |
| 3.2 添加肉碱对精子冻融后脂质过氧化的影响 |
| 3.3 添加肉碱对精子冻融后总抗氧化能力的影响 |
| 3.4 添加肉碱对精子冻融后凋亡因子表达水平影响 |
| 3.5 添加肉碱对精子冻融后抗氧化相关基因MRNA表达水平影响 |
| 3.6 添加肉碱对精子冻融后精子精卵结合能力的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 肉碱对精子的保护作用 |
| 4.2 肉碱对凋亡相关基因的影响 |
| 4.3 肉碱对抗氧化相关基因的影响 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录A (在读期间发表论文) |
（5）日粮n-6:n-3比和维生素E对公猪繁殖力的改善及其作用机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 前言 |
| 2 公猪繁殖力的评价 |
| 2.1 精液品质 |
| 2.2 性欲 |
| 2.3 体外受精能力 |
| 2.4 母猪受胎率 |
| 3 影响公猪繁殖力的因素 |
| 3.1 动物因素 |
| 3.2 环境因素 |
| 3.3 饲养管理 |
| 3.4 日粮因素 |
| 4 精子膜结构和功能 |
| 4.1 精子膜的物质组成及结构特性 |
| 4.2 精子膜完整性与精子受精能力 |
| 4.3 精子膜流动性与精子受精能力 |
| 4.4 线粒体膜电位与精子受精能力 |
| 5 活性氧在精子功能中的作用 |
| 5.1 活性氧的产生及在精子功能中的生理意义 |
| 5.2 氧化应激对精子功能的损伤 |
| 5.3 精子中的抗氧化防御体系 |
| 6 日粮多不饱和脂肪酸 |
| 6.1 日粮多不饱和脂肪酸的定义及来源 |
| 6.2 日粮多不饱和脂肪酸在公猪繁殖中的作用 |
| 6.3 日粮n-3 多不饱和脂肪酸在公猪繁殖中的研究进展 |
| 6.3.1 日粮n-3 多不饱和脂肪酸对精子膜结构和功能的影响 |
| 6.3.2 日粮n-3 多不饱和脂肪酸对精子活性氧产生的影响 |
| 6.3.3 日粮n-3 多不饱和脂肪酸提高公猪繁殖力的效果 |
| 6.4 多不饱和脂肪酸日粮中维生素E的应用 |
| 7 研究假设与研究目的意义 |
| 第二章 日粮n-6:n-3 比和维生素E对公猪精液品质、精子脂肪酸组成及抗氧化状态的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验动物 |
| 2.2 试验设计 |
| 2.3 饲养管理 |
| 2.4 精液品质 |
| 2.5 血清样和精液样的采集 |
| 2.6 精子脂肪酸的测定 |
| 2.6.1 精子脂肪酸前处理液制备 |
| 2.6.2 色谱分析方法 |
| 2.7 血清和精液中抗氧化状态的测定 |
| 2.8 仪器与试剂 |
| 3 数据统计分析 |
| 4 结果 |
| 4.1 精液品质 |
| 4.2 精子脂肪酸组成 |
| 4.3 血清、精子和精清抗氧化状态变化 |
| 5 讨论 |
| 第三章 日粮n-6:n-3 比和维生素E对公猪精子产出、精子运动能力及精子形态特征的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验动物与分组 |
| 2.2 试验日粮 |
| 2.3 试验设计 |
| 2.4 饲养管理 |
| 2.5 样品采集 |
| 2.6 性欲及精液品质 |
| 2.7 主要仪器及试剂 |
| 3 数据统计 |
| 4 结果 |
| 4.1 精子产出 |
| 4.2 精子运动能力 |
| 4.3 常温保存后精子活力 |
| 4.4 精子形态特征 |
| 4.5 公猪性欲的变化 |
| 5 讨论 |
| 第四章 日粮n-6:n-3 比和维生素E对公猪精子膜结构、膜功能和抗氧化状态的影响及其改善公猪繁殖力的机理 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验动物 |
| 2.2 试验日粮 |
| 2.3 饲养管理 |
| 2.4 样品采集 |
| 2.4.1 血清样品 |
| 2.4.2 精子和精清样品 |
| 2.5 试验指标 |
| 2.5.1 精子脂肪酸组成 |
| 2.5.2 精子维生素E |
| 2.5.3 精子膜结构和功能 |
| 2.5.4 血清和精液抗氧化状态 |
| 2.6 仪器与试剂 |
| 2.6.1 主要仪器 |
| 2.6.2 主要试剂和药品 |
| 2.6.3 主要试剂及配置 |
| 3 数据统计 |
| 4 结果 |
| 4.1 公猪精子脂肪酸组成 |
| 4.2 精子中维生素E含量的分析方法 |
| 4.3 公猪精子膜结构和功能 |
| 4.4 血清抗氧化状态 |
| 4.5 精子抗氧化状态 |
| 4.6 精清抗氧化状态 |
| 5 讨论 |
| 第五章 总体讨论和结语 |
| 1 总体讨论 |
| 2 结语 |
| 2.1 主要结论 |
| 2.2 本研究的创新点 |
| 2.3 需进一步研究的问题 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（6）非梗阻性不育患者精子膜超微结构研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 受试对象 |
| 1.2 标本采集和处理 |
| 1.3 观察指标 |
| 2 结果 |
| 2.1 质膜的异常 |
| 2.2 顶体内外层膜的异常 |
| 3 讨论 |
（7）一氧化氮在人精子体外获能过程中作用的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写词 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（9）二硫化碳对共培养大鼠睾丸支持—生精细胞凋亡和凋亡相关蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 英文缩写词 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 大鼠支持-生精细胞体外共培养 |
| 1.2 Feulgen 染色法 |
| 1.3 MTT 法 |
| 1.4 末端转移酶标记技术（TUNEL 法） |
| 1.5 P53 和Bcl-2 蛋白表达的检测（Western Blot 法） |
| 1.6 Fas 和FasL 蛋白定位与表达的检测（免疫细胞化学法） |
| 2 结果 |
| 2.1 体外共培养大鼠支持-生精细胞的形态变化 |
| 2.2 大鼠支持细胞和生精细胞的鉴定 |
| 2.3 CS_2 对共培养大鼠支持-生精细胞存活率的影响 |
| 2.4 CS_2 对共培养大鼠支持-生精细胞凋亡作用的影响 |
| 2.5 CS_2 对大鼠支持-生精细胞P53 和Bcl-2 蛋白表达的影响 |
| 2.6 CS_2 对大鼠支持-生精细胞 Fas 和 FasL 蛋白定位与表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 关于大鼠睾丸支持-生精细胞共培养体系的建立 |
| 3.2 CS_2 对大鼠睾丸支持-生精细胞的凋亡作用 |
| 3.3 CS_2 对大鼠睾丸支持-生精细胞凋亡相关蛋白的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 附录(在读研究生期间参与的教学、科研和论文发表情况) |
| 致谢 |
（10）一氧化氮和一氧化氮合酶对雄性生殖系统的作用（论文提纲范文）
| 1 NO、NOS对生殖器官的调节作用 |
| 1.1 NO对睾丸微循环的作用 |
| 1.2 NO对阴茎勃起功能的调节 |
| 1.3 NO对前列腺的作用 |
| 2 NO、NOS对雄性激素分泌的调节 |
| 2.1 参与下丘脑-垂体-性腺轴的调节 |
| 2.2 参与睾酮的分泌调节 |
| 2.3 NO、NOS与雄激素的相互作用 |
| 3 NO、NOS对精子的调节作用 |
| 3.1 参与精子的发生和运输 |
| 3.2 对精子活力的调节作用 |
| 3.3 对受精能力的影响 |
| 3.4 对精子膜脂质过氧化反应的影响 |
四、一氧化氮对精子膜功能完整性的影响（论文参考文献）
- [1]益肾活血饮改善肾虚血瘀证VC患者SDF及胚胎质量的随机对照研究[D]. 袁启龙. 广州中医药大学, 2020(09)
- [2]NO对冷藏桃果实品质相关的线粒体及其DNA聚合酶表达的调控作用[D]. 田雯. 石河子大学, 2020(08)
- [3]MTHFR基因多态性与公猪精液品质的相关性的研究[D]. 赖文. 华中农业大学, 2019(02)
- [4]肉碱对冻融后猪精子生物学特性及抗氧化、抗凋亡的影响[D]. 徐曼. 延边大学, 2019(01)
- [5]日粮n-6:n-3比和维生素E对公猪繁殖力的改善及其作用机理研究[D]. 刘庆. 华中农业大学, 2016(02)
- [6]非梗阻性不育患者精子膜超微结构研究[J]. 王然,殷会莹,郭明申,刘淑卓,葛少钦. 医学研究与教育, 2014(01)
- [7]一氧化氮在人精子体外获能过程中作用的实验研究[D]. 王江涛. 福建医科大学, 2011(09)
- [8]一氧化氮和一氧化氮合酶对男性生殖系统的作用[J]. 贺鹏,杨彦玲. 延安大学学报(医学科学版), 2008(02)
- [9]二硫化碳对共培养大鼠睾丸支持—生精细胞凋亡和凋亡相关蛋白表达的影响[D]. 季佳佳. 华中科技大学, 2008(05)
- [10]一氧化氮和一氧化氮合酶对雄性生殖系统的作用[J]. 季佳佳,赵艳芳,陈国元. 卫生研究, 2007(05)