一、Study of the Ion Channel Behavior of Didodecyldimethylammonium Bromide Formed Bilayer Lipid Membrane Stimulated by PF_6~-（论文文献综述）
白东亚[1]（2020）在《金属离子调制变构智能芳香螺旋结构的设计合成及其应用研究》文中研究说明螺旋结构是生命体系中最基本的结构单元之一,它承载着生命活动中许多独一无二的功能,比如DNA双螺旋结构能够巧妙地实现遗传信息的储存与传递,蛋白质中的α螺旋与细胞膜内外物质的选择性传输、酶催化以及抗体的特异性识别等均有着密切的关联。为了模拟天然螺旋的结构及功能,科学家们开始利用有机合成的方法,创造出了许多人造螺旋结构,并且开发了其许多新的应用。其中,芳香螺旋具有结构稳定、折叠构象可预测等特点,在最近二十年得到了快速的发展。同时,芳香螺旋结构特有的伸缩、折叠-解折叠、单双螺旋互变等潜在动态特征使得它在智能材料领域具有广阔的应用前景。此外,芳香螺旋结构固有的手性和特殊的空腔,允许科学家通过合理的设计,赋予其特有的空腔尺寸和微环境,进而开发诸如离子通道、特异性识别、可控封装与释放、手性分离等潜在的应用。基于日趋成熟的设计理念和多样化的结构片段与弱作用力,目前已经有许多类别的芳香螺旋结构被设计合成出来。但是,由于芳香螺旋过于刚性的结构带来的反应活性低,溶解性差等限制,使得芳香螺旋结构的功能化设计与合成仍面临巨大的挑战。尤其值得注意的是,目前已报道的芳香螺旋结构,大多紧密堆积导致内部空腔过小且不可调控,个别例外也仅局限于结构的设计与优化,这些都大大制约了其智能化功能的开发。基于此,本论文设计合成了两种分别具有开放和封闭空腔的中空螺旋和螺旋胶囊,通过金属离子和螯合剂调控其构象的可逆变化,进而分别探索其在门控离子通道和对客体分子的可控封装与释放中的潜在应用。1、可金属离子调控单双螺旋构象互变的智能芳香螺旋结构的设计合成以1,10-菲啰啉衍生物为基元,借助简单高效的Click反应,通过1,10-菲啰啉与亚铜离子配位先形成麻绳状缠绕双螺旋链,然后再去配位形成单螺旋的合成策略,打破了反应位点空间位阻对反应活性的限制,成功得到了具有不同侧链的中空芳香螺旋三聚体。然后,利用一维/二维核磁氢谱、圆二色谱和X射线单晶衍射等分析证明了目标分子1在固相和溶液相中的稳定中空螺旋构象。基于目标螺旋分子内部空腔多氮原子的设计,其与Cu离子发生配位形成的缠绕双螺旋结构也被X射线单晶衍射所证实。随后,通过Cu+滴定和螯合剂（氨水）反滴定的核磁、紫外、荧光和圆二色谱实验进一步证实了中空单螺旋与缠绕双螺旋构象之间的可逆互变行为。2、利用自组装一维（1D）中空螺旋管构建可逆原位门控离子通道尽管大分子量的芳香螺旋结构合成十分困难,但是芳香螺旋寡聚物可以通过分子间π-π相互作用在1D方向发生首尾全重叠堆积形成中空螺旋管状结构。借助原子力显微镜、扫描和透射电子显微镜证明了目标三聚体1单螺旋形成的中空螺旋管,且该结构可以通过Cu离子配位和螯合剂（氨水）去配位实现其可逆的解组装和重新组装。同时,利用荧光显微镜证实了该1D中空螺旋管具有良好的嵌膜能力。随后,使用包裹有溶剂绿（HPTS）的大单层磷脂囊泡（LUVs）和电化学平面脂双层实验对中空螺旋管的离子传输性能进行评估,结果显示出了稳定、有效的离子传输性能。最后,分别通过向1?LUVs中滴定一价铜离子和向12-[Cu（CH3CN）4PF6]4? LUVs中滴定氨水,实现了该离子通道在磷脂双层原位的逐渐关闭与打开。至此,利用目标三聚体单螺旋形成的1D中空螺旋管,通过铜离子的配位和去配位诱导单双螺旋互变,进而实现中空螺旋管可逆的组装与解组装,成功构建了第一例原位可逆配体门控的芳香螺旋离子通道。3、可金属离子调控局部解折叠的智能螺旋胶囊的设计合成基于1,10-菲啰啉2、9号位近似60°的夹角及其与Cu+/Cu2+的特殊配位形态,以1,10-菲啰啉为中间结构单元,1,3,4-恶二唑为键连方式,喹啉二聚体为封端结构片段,设计合成了一类具有杂原子化封闭空腔的螺旋胶囊分子。利用二维核磁、圆二色谱和X射线单晶衍射等分析手段证明了目标分子在固相和溶液相中的稳定螺旋胶囊构象。随后通过Cu+、Cu2+滴定及螯合剂（氨水）反滴定,借助核磁、紫外、荧光和圆二色谱分析证明了该螺旋胶囊与Cu2+的选择性配位,并且通过Cu2+和氨水的依次加入,初步确定了芳香螺旋胶囊局部螺旋构象的可逆解折叠与折叠。
花昌林[2]（2020）在《两种注射用增溶辅料的设计合成》文中提出非离子表面活性剂的水溶液呈非解离状态,与离子型表面活性剂相比具有更高的稳定性和生物相容性,因其不受电解质和溶液的影响,且低毒性、低溶血性等特征,可用于医药行业中作为配伍辅料使用。目的:设计并合成出具有生物安全性高的非离子表面活性剂,经分离纯化后,以Tween 80为对照品,紫杉醇为模型药,考察产物表面特征以及增溶、溶血安全性相关参数,以期得到安全性高的注射用增溶辅料,为药用辅料的开发研究提供参考办法。方法:以10-十一烯酸、1,12-十二醇为原料,对甲苯磺酸为催化剂,甲苯-二甲苯作为带水剂,合成出二-10-十一烯酸十二烷基二醇酯,反应条件为:油醇比2:1,1 wt%的对甲苯磺酸,135～155℃回流3 h,得到粗产品。一步产物溶于二氯甲烷中,分批次加入2.2倍量的间氯过氧苯甲酸室温搅拌70 h,经过滤、洗涤后得到粗品;石油醚:乙酸乙酯=9:1上柱洗脱,旋干后得到二-10-环氧十一烷酸十二烷基二醇酯,两步总产率为85.53%。将制得的二步产物溶解于三氯甲烷中,加入4倍量的聚乙二醇（300-1000）,加热45℃溶解后,氮气保护下快速搅拌并逐滴加入2 wt%的三氟化硼乙醚,升温70℃并维持3 h,ODS上柱分离,旋干后得到淡黄色油状液体至蜡状固体,此PEG-Bola型多元醇脂肪酸酯产率为78.25-28.51%。同理,以油酸、1,12-十二醇和聚乙二醇为原料,经上述相同步骤合成出PEG-Gemini型多元醇脂肪酸酯,并对此步粗产物进行了分离纯化。经IR、NMR对上述三步产物进行结构表征,确定了产物结构。对产物进行纯度检测,红外（IR）、核磁共振谱图(1H-NMR、13C-NMR)分析,表征了相关参数,测试了目标分子的增溶活性和溶血安全性。结果:以市售注射用Tween 80为对照,通过测定Bola和Gemini非离子表面活性剂的表面张力(γCMC)、临界胶束浓度（CMC）、增溶性和溶血安全性,优选出比Tween 80更好的绿色安全型注射用增溶辅料。实验结果表明:DUADGE-PEGE 800的CMC值为0.0128 g·L-1,γCMC值为44.1 m N·m-1,增溶曲线k和安全浓度分别为1.49和3.00,计算安全有效指数为10.55;DUADAE-PEGE1000的CMC值为0.00994 g·L-1,γCMC值为37.7 m N·m-1,增溶曲线k和安全浓度分别为1.10和5.00,计算安全有效指数为13.34;对照品Tween 80的CMC值为0.0160 g·L-1,γCMC值为37.5 m N·m-1,增溶曲线k和安全浓度分别为1.39和0.3,计算安全有效指数为1.00。经对比发现,DUADGE-PEGE 800和DUADAE-PEGE 1000的相关表征值均低于Tween 80,安全有效指数达到Tween80的10倍,说明目标产物的总体性能优于市售注射液增溶辅料Tween 80。结论:1.合成的Bola和Gemini非离子表面活性剂随着亲水基团聚氧乙烯聚合度的增加,溶血活性减少,甚至比具有相近HLB值的非离子表面活性剂Tween 80细胞膜活性还要低,不易导致溶血。2.综合数据表明,Gemini型非离子表面活性剂整体优于Bola型十一烷酸系列表面活性剂,相比于Tween 80,DUADGE-PEGE 800、DUADGE-PEGE 1000和DUADAE-PEGE 1000具有在难溶药物的制剂开发的应用前景,更适于作为注射用增溶辅料使用。
马春萌[3]（2020）在《氯离子和磷酸盐离子载体的合成及对细胞活性的干扰作用》文中提出阴离子在维持细胞的生理活性中扮演着重要角色,参与细胞增殖、细胞兴奋性调节、pH调节和免疫应答等重要生理活动,而阴离子失衡通常会对细胞活性产生干扰,甚至引起细胞死亡,因此,研究这一过程具有重要的生理学意义。而阴离子的跨膜运输受到细胞膜的严格调控,无法自由穿过细胞膜进入细胞,必须借助于一定的载体。近年来,材料类载体的兴起为药物递送领域提供了广阔的空间,尺寸合适的载体材料能通过胞吞作用跨越细胞膜。本论文基于聚合物和二维纳米材料构建了氯离子和磷酸盐离子载体,利用内吞作用将阴离子运进细胞,改变细胞的离子平衡,并对于其引起的细胞活性的干扰进行了研究。具体内容如下:1.以6-甲氧基喹啉-N-丙胺为主要单体合成了一种超交联聚合物作为氯离子载体,采用简单的Friedel-Crafts反应合成。通过BET比表面积分析,扫描电镜,动态光散射等一系列手段对材料进行表征,对其吸附性能及条件进行了优化。在pH为3时聚合物表面带有大量正电荷,并且在该条件下对氯离子的吸附量可达205.6 mg/g,对氯离子有较好的负载作用。2.设计合成了一种基于pH响应的聚酰腙胶束作为磷酸盐离子载体PGAH,在pH=4的Hepes缓冲溶液中,PGAH对磷酸盐离子有最优吸附,并且表现出较好的选择性。我们通过研究PGAH-P对磷酸盐离子的释放及其对Hela细胞的影响,实验结果显示PGAH-P能进入Hela细胞并释放磷酸盐离子,诱导Hela细胞发生凋亡,并且造成线粒体膜通透性的变化和膜电位的降低。3.制备了一种负载青蒿素的黑磷纳米片作为磷酸盐离子载体,并且加入靶向基团使载体具有癌细胞靶向功能。我们对载体进入癌细胞后释放磷酸盐离子的过程进行了研究,结果表明载体可通过靶向作用进入Hela细胞,并在癌细胞的微酸性环境下逐步分解产生磷酸盐离子,引起细胞中磷酸盐离子水平升高,破坏离子平衡,导致癌细胞发生坏死。
李力[4]（2017）在《基于光学纳米材料的阵列传感、生物成像及H2S光热产生研究》文中研究指明近年来,伴随着纳米技术的快速发展,一系列具有特殊物理化学性质的功能纳米材料被开发出来,为构建多功能光学纳米复合体系用于生物传感、生物成像及疾病诊疗提供了契机。其中量子点、金纳米颗粒、石墨烯等因为具有独特的光学性能、易功能化修饰及良好的生物相容性等特点,在荧光检测、光学成像、诊断治疗等方面得到广泛的研究与应用。同时,气体分子治疗作为疾病治疗的新型方法,尚处于起步阶段,在智能响应、可控释放、特异靶向等方面仍存在诸多关键科学问题亟待解决。基于此,本文利用量子点、金属纳米颗粒以及石墨烯的特殊光学特性,结合二硫代氨基甲酸衍生物的热解性能,发展新型光学纳米生物传感技术和成像方法,并拓展纳米材料在H2S气体分子治疗方面的初步研究。本文开展了以下几个方面的研究工作:一、基于量子点-荧光染料荧光共振能量转移（FRET）纳米胶束的血清蛋白阵列传感研究采用不同的表面活性剂和聚合物同时包被荧光量子点和Texasred-DHPE染料,构建了七种差异响应的FRET纳米胶束,成功实现了五种血清蛋白的阵列区分和检测。首先分别采用聚甲基丙烯酸钠、聚苯乙烯磺酸钠-马来酸共聚物、聚二烯丙基二甲基氯化铵、聚烯丙基胺盐酸盐四种聚合物和十二烷基磺酸钠、十二烷基肌氨酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、十二烷基三甲基溴化铵四种表面活性剂,基于自组装方法制备了七种不同的纳米胶束,将FRET探针（量子点和Texasred-DHPE）同步包被于纳米胶束中。进一步选择免疫球蛋白、人血清白蛋白、α-抗胰蛋白酶、纤维蛋白原、运铁蛋白五种血清蛋白与七种纳米胶束相互作用,构建了 7X5的阵列图谱,基于差异性荧光响应以及线性判别分析处理,成功实现了五种血清蛋白的图谱区分。电镜、动态光散射等结果表明,七种纳米胶束存在结构性能差异,在目标血清蛋白的竞争结合下,发生了结构变化和解组装,释放出染料分子而引起FRET信号的差异响应。基于量子点阵列图谱的血清检测方法具有简单、快速、高通量的特点;此外,该方法也成功应用于蛋白浓度未知情况下的血清蛋白区分。本工作为量子点传感和生物检测提供了一种新的传感模式。二、基于量子点-亚甲基蓝FRET纳米胶束的近红外生物成像研究将FRET探针对（量子点供体,亚甲基蓝受体）同时包裹于十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）的纳米胶束中,发展了具有长斯托克位移的近红外荧光纳米探针,实现了细胞与活体水平的高信背比荧光成像。首先采用微乳液的方法,将荧光发射波长为605 nm的CdSe/ZnS疏水性量子点与亚甲基蓝同时包被于CTAB纳米胶束。结果表明该胶束尺寸约为6.8 nm,具有良好的胶体稳定性;在紫外光连续光照5 h后,荧光强度和峰位没有明显的变化,表现较高的光稳定性。该体系基于量子点与亚甲基蓝的FRET效应,最大FRET效率达到82.2%,斯托克位移扩大到约202 nm。进一步应用于细胞与活体成像,信背比显着提高。该工作发展了基于量子点纳米颗粒的长斯托克位移的近红外荧光纳米探针,为近红外活体成像提供了有力工具。三、二硫代氨基甲酸盐介导的金纳米颗粒仿生合成及其细胞拉曼成像应用研究基于氨基酸衍生化的二硫代氨基甲酸盐的热解效应,实现了不同氨基酸生物修饰的金颗粒的仿生合成,并成功应用于细胞水平的表面增强拉曼成像。首先采用甘氨酸、谷氨酸和组氨酸三种氨基酸与CS2反应分别制备了三种不同的二硫代氨基甲酸盐。该盐在高温下分解生成H2S等小分子,作为还原剂将氯金酸还原,成功制备了金纳米颗粒。金纳米颗粒具有良好的胶体稳定性和优异的生物相容性;此外,该金纳米颗粒具有表面增强拉曼效应,对罗丹明的拉曼增强因子高达9.8×105。应用于细胞拉曼成像时,在1363 cm-1和1509 cm-1处体现较强的拉曼增强信号。该工作提供了一种简单快速、效率高、绿色的金颗粒仿生合成途径,在生物医学和生物传感领域中表现出较大的应用前景。四、包载二硫代氨基甲酸盐和金银合金颗粒的聚合物微米球用于H2S的光热产生及其细胞应用研究本章构建了包被有H2S供体（甘氨酸的二硫代氨基甲酸盐,Gly-DTC）和近红外光热金银合金（Au@Au/AgNPs）的聚合物微米颗粒,基于微米颗粒H2S的光热产生,实现了细胞的H2S信号响应。首先,基于自组装的方法同步将Gly-DTC和Au@Au/AgNPs纳米颗粒包被于聚合物微米球中。聚合物微米球尺寸为13.6±3.5μm,具有良好的近红外光热性能;在780 nm的近红外光照下,聚合物微米球中的Au@Au/AgNPs的光热效应诱导Gly-DTC热降解并产生H2S,荧光方法测得H2S的产生量为68.1 μM。进一步将聚合物微米球与细胞共培育,聚合微米球同样具有近红外光响应特性,荧光成像表明光热产生的H2S可传递到CEM细胞中,实现了对细胞的气体刺激以及H2S浓度的调控。本工作发展了远程、无创、实时的近红外光照产生H2S的新方法,为研究智能调控细胞内H2S水平提供了新思路。五、二硫代氨基甲酸盐-还原氧化石墨烯复合物的H2S光热产生及细胞内自由基清除研究本章构建了近红外刺激响应的纳米复合体系,基于纳米颗粒的H2S光热产生效应,有效抑制了细胞内的活性氧（ROS）产生和H2O2的损伤作用。采用聚乙烯亚胺合成聚乙烯亚胺的二硫代氨基甲酸盐衍生物（H2S供体,PEI-DTC）,并基于静电作用吸附在还原氧化石墨烯（RGO）表面,制备得到PEI-DTC/RGO纳米复合物。结果表明该纳米复合物具有近红外光刺激响应特性,有良好的光热转换性能,可光热产生H2S,荧光法测得产生H2S的高达到66.7 μM。进一步将其与HeLa细胞作用,发现该纳米复合物在细胞内同样具有近红外光热产生H2S特性,并有效降低细胞内的ROS和Caspase3水平,其中Caspase3表达量降低了 24.8%,避免了细胞由H2O2所引起的损伤,抑制了细胞凋亡。该工作提供了一种简便、廉价、高效的H2S供体聚合物制备方法,提供了新的细胞内ROS和H2O2清除途径,为细胞抗氧化研究提供重要参考,该纳米复合物有望应用于气体分子治疗等研究领域。
林显坤[5]（2010）在《嵌段分子—多金属氧簇超分子复合体系组装与结构研究》文中研究表明多金属氧簇是一种纳米尺度的单分子簇合物。它们化学组成丰富,拓扑结构多样,并具有丰富的物理化学性质,在多种领域具有很大的应用潜力。它们被认为是一类有前景的超分子结构和功能材料构筑基元。然而常见的多金属氧簇无机晶体是不易加工的,不利于将其集成到功能薄膜和器件中。运用超分子化学的概念实现各种辅助构筑基元与多金属氧簇的有序可控复合是改善多金属氧簇加工性和优化其功能特性的有效方法。两亲性或两嵌段分子作为一种辅助构筑基元在指导多金属氧簇的组织化方面展现了独特的优势,具有很大的灵活性。在本论文中,我们以超分子化学的概念为指导思想,以具有两亲性或两嵌段形式的分子为自组装基元,围绕嵌段分子-多金属氧簇复合体系的超分子自组装进行了研究,并获得了新的超分子自组装结构。本论文的研究内容主要包括以下三部分工作:1,设计合成了具有聚氧乙烯醚链的季铵盐型嵌段分子,成功地制备了具有纳米棒形貌和六方堆积介观结构的嵌段分子-硅钨酸复合体。通过该复合体的解组装,首次获得了在水溶液中的一维嵌段分子-多金属氧簇复合体聚集结构;2,设计合成了具有短聚氧乙烯醚链的季铵盐型嵌段分子,并利用其制备了系列表面活性剂包埋的多金属氧簇复合物,对复合物和嵌段分子的热性质进行了系统的研究,发现在一定的条件下可以在不采用介晶基团或氢键前体的情况下实现复合物的热致液晶性;3,首次利用多金属氧簇诱导了聚苯乙烯-b-聚（4-乙烯基吡啶）在DMF中的胶束化,并研究了多金属氧簇电荷数和掺杂量对复合体胶束形貌及尺寸的影响,以及所得胶束的稳定性。同时,还获得了由嵌段共聚物-硅钨酸蠕虫状胶束所形成的网络状结构。这些新的超分子聚集结构有望为今后多金属氧簇的应用开发提供新的基础。
郝刚[6]（2009）在《BuforinⅡ抗菌肽的分子设计及对DNA作用抑菌机理研究》文中认为抗菌肽的研究有几十年的历史,而各国学者研究抑菌机理主要集中在膜作用机制上。有些抗菌肽并不破坏膜结构,而是直接穿过胞膜,作用于胞内靶点,这可能就是其胞内分子作用抑菌机制。分离自蟾蜍胃组织中的抗菌肽BuforinⅡ能穿透细胞膜,直接作用于胞内DNA。不同于作用膜的抗菌肽,DNA作用抗菌肽有其独特的抑菌机制,但它的具体抑菌模式仍不清楚,值得我们去深入研究。本文在BuforinⅡ衍生肽BF2-A的结构特征基础上,设计合成了一个新肽BF2-X。BF2-X是将BF2-A的N-端保持不变,在第十位精氨酸上接入一个三次重复的α-螺旋序列RLLR,并将第8位上的缬氨酸用亮氨酸取代。经生物信息学软件分析,两个阳离子肽都没有跨膜区,与BF2-A相比,BF2-X的螺旋度与正电荷增加,疏水性比例提高,C-端两亲性增强。当置于疏水环境中时,BF2-A/X会由自由卷曲结构诱导成α-螺旋结构,且BF2-X的α-螺旋含量高于BF2-A。它们对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等细菌以及白色念珠菌等真菌有广谱的抗菌活性,BF2-X对细菌的抗菌活性强于BF2-A,其对大肠杆菌和金葡菌的抗菌活性是BF2-A的两倍。BF2-X杀菌比BF2-A快速,浓度的提高明显增强BF2-X的抗菌活性,而BF2-A不是浓度依赖性的抗菌肽。两个抗菌肽没有体外溶血活性,也没有细胞毒性,能结合脂多糖中和内毒素,对热稳定,最适pH为中性。BF2-A/X对胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶具有抵抗力,但不能抵抗蛋白酶K的酶解,也不耐受高离子强度溶液。BF2-X引起脂质体包裹的荧光染料的泄漏是浓度依赖性的,其泄漏率比BF2-A高,但它们都不能使脂质体膜破裂。BF2-A能增加G-菌外膜的渗透性但不能增加细菌质膜的通透性,BF2-A能引起钾离子泄漏,但它处理后的细菌胞膜保持完整。BF2-X能增加细菌外膜、质膜渗透性,5MIC时还能诱导胞内大分子的轻微泄漏。BF2-X对细菌胞膜的通透作用比BF2-A大,引起钾离子泄漏量略多于BF2-A,但它并不崩塌细胞膜。由于提高了C-端的螺旋度和疏水性,无论对G-菌还是G+菌,BF2-X穿透细胞质膜的效率都要比BF2-A高。BF2-A/X能够进入大肠杆菌细胞内累积,其作用靶标是DNA/RNA,但它们都不能断裂基因组DNA,而是结合DNA和RNA。螺旋度和疏水性的增强使BF2-X结合DNA的能力比BF2-A强,但BF2-A结合RNA的能力却比BF2-X强。BF2-A/X能利用静电吸引结合到DNA上,能够插入到DNA双螺旋的沟槽中使双螺旋结构变得松散,还能嵌入DNA碱基对间,削弱碱基对间的π-π堆积作用。BF2-X还能使DNA从B构型往C构型转变,它插入DNA的沟槽及嵌入碱基对的能力比BF2-A强。BF2-A/X趋向与大肠杆菌基因组DNA上的两个区段进行特异性结合,其中一个区段是23S rRNA基因上的一段保守序列。BF2-A/X结合DNA和RNA后首先影响的不是DNA的复制功能,而是基因的转录功能,它们优先抑制RNA的合成而不是DNA的合成。BF2-X抑制DNA和RNA合成的能力都比BF2-A强。两个抗菌肽还能优先抑制蛋白的合成,BF2-A抑制蛋白合成的能力则比BF2-X强。抗菌肽还能影响细胞的氧化磷酸化过程,显着抑制细菌的呼吸作用和ATP的合成,其中BF2-X的抑制比BF2-A更强烈。BF2-A/X通过影响细胞能量代谢的方式,进一步影响蛋白和核酸的生物合成。本文研究比较了BF2-A/X的抗菌机理以及构效关系,发现它们不破裂细胞膜,而是进入胞质结合DNA和RNA达到抑菌目的。与BF2-A不同,BF2-X是个浓度依赖性抗菌肽,由于提高了其C-端的疏水性比例与螺旋度,它增加了质膜的渗透性,使其穿透细胞膜的效率较高,结合DNA的能力更强,抑制DNA和RNA合成的能力也更强,这就是它抗菌活性比BF2-A强,杀菌迅速的原因。本文的研究结果将为我们更好地了解和利用这类DNA作用抗菌肽奠定坚实的基础。
张楠[7]（2007）在《转基因植物安全筛选标记基因的克隆和NAMP/Bt融合蛋白基因克隆及其原核与植物表达载体的构建》文中研究说明为了加快作物遗传改良的进程,将外源目的基因导入植物体,并筛选出极少量的转化细胞,一套高效安全的选择方法极为重要。以往的筛选标记因为存在于转基因植物中时,其抗生素或除草剂抗性的标记基因是否会转移到微生物或杂草中,使病原菌或杂草获得抗性,对环境及人类健康有不良影响和损害。D-丝氨酸对植物有一定的毒性,它是由大肠肝菌体内的D-丝氨酸脱水酶（D-serine dehydratase,dsdA ）基因编码的D-丝氨酸氨水裂解酶（D-serine ammonia lyase）可以解除D-丝氨酸对植物的毒性。对植物来说,很多组织缺乏正常的途径对D-氨基酸进行氧化脱氨基作用,由于这种消化系统的不同导致的结果是,有几种D-氨基酸本身对植物是有毒性的,即使在D-氨基酸相对浓度较低的情况下。因此,可以利用这种专一的对植物有毒性的D-氨基酸裂解酶作为一个安全的筛选标记。D-丝氨酸脱水酶对D-丝氨酸催化脱氨基作用,生成丙酮酸盐（或脂）、水、氨水,dsdA转基因的种子可以很明显的从野生型中筛选出来,而且氨基酸很容易被消化掉,并转变为水、氨水和丙酮酸盐（或脂）对环境没有污染,是一种很好的安全标记。本研究设计特异引物通过聚合酶链式反应从大肠肝菌菌体中克隆获得D-丝氨酸脱水酶基因（dsdA）,并将其连接到T载体上进行测序同源性可达到99.93%,将测序过的dsdA基因连接于原核表达载体pET-28a上,通过IPTG诱导,聚丙烯酰胺电泳（SDS-PAGE）检测,dsdA在原核生物中得到了很好的表达,蛋白条带为48.0KDa。然后,把dsdA构建到含有kan的筛选标记的pBI-121的植物表达载体中,通过遗传转化到烟草植物中,分别用dsdA和kan来筛选转基因植物以检验dsdA的抗性效果。试验结果表明,以dsdA作为筛选标记就行筛选时,使用D-serine作为筛选剂进行筛选时用量较大且起效较慢,在前期筛选时没有卡那霉素敏感。
二、Study of the Ion Channel Behavior of Didodecyldimethylammonium Bromide Formed Bilayer Lipid Membrane Stimulated by PF_6~-（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Study of the Ion Channel Behavior of Didodecyldimethylammonium Bromide Formed Bilayer Lipid Membrane Stimulated by PF_6~-（论文提纲范文）
（1）金属离子调制变构智能芳香螺旋结构的设计合成及其应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 第一章 前言 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 芳香螺旋结构 |
| 1.2.1 以苯环为骨架构筑的螺旋结构 |
| 1.2.2 以含氮杂环为骨架构筑的螺旋结构 |
| 1.2.3 芳香环与含氮杂环直接键连构筑的螺旋结构 |
| 1.3 智能芳香螺旋结构的动态调控 |
| 1.3.1 光照刺激响应的芳香螺旋结构 |
| 1.3.2 金属离子调控的芳香螺旋结构 |
| 1.3.3 pH刺激响应的芳香螺旋结构 |
| 1.3.4 温度刺激响应的芳香螺旋结构 |
| 1.4 芳香螺旋结构的应用 |
| 1.4.1 对映体分离 |
| 1.4.2 客体分子识别 |
| 1.4.3 水分子通道和离子通道 |
| 1.5 立论依据 |
| 第二章 可金属离子调控单双螺旋构象互变的智能芳香螺旋结构的设计合成 |
| 2.1 螺旋结构的设计 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 目标分子的合成与表征 |
| 2.3 实验结果与讨论 |
| 2.3.1 目标分子的结构确定 |
| 2.3.2 目标分子单螺旋构象分析 |
| 2.3.3 目标分子与CU(I)配位后的双螺旋构象分析 |
| 2.3.4 单双螺旋互变行为分析 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 利用自组装一维中空螺旋管构建可逆原位门控离子通道 |
| 3.1 序言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 AFM、SEM和TEM测试 |
| 3.2.4 GUVs和 LUVs的制备 |
| 3.2.5 离子跨膜运输实验 |
| 3.2.6 单通道电流实验 |
| 3.3 实验结果与讨论 |
| 3.3.1 化合物1一维自组装结构分析 |
| 3.3.2 自组装一维中空螺旋管嵌膜能力分析 |
| 3.3.3 包裹有HPTS的 LUVs分析 |
| 3.3.4 一维中空螺旋管作为离子通道门控行为的研究 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 可金属离子调控局部构象解折叠的智能螺旋胶囊的设计合成 |
| 4.1 序言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.2.3 合成路线 |
| 4.3 实验结果与讨论 |
| 4.3.1 目标分子在固相中的螺旋构象分析 |
| 4.3.2 目标分子在溶液相中的螺旋构象分析 |
| 4.3.3 金属离子调控螺旋胶囊构象分析 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（2）两种注射用增溶辅料的设计合成（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语对照表 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 1 非离子表面活性剂分类概述 |
| 1.1 非离子表面活性剂定义 |
| 1.2 非离子表面活性剂结构 |
| 1.3 非离子表面活性剂的分类和应用 |
| 1.3.1 聚氧乙烯基醚类 |
| 1.3.2 多元醇酯类 |
| 1.3.3 胺类非离子表面活性剂 |
| 1.3.4 嵌段聚醚类 |
| 2 表面活性剂溶血安全性及机制概述 |
| 2.1 红细胞膜特征与形态学改变 |
| 2.1.1 红细胞膜结构特征 |
| 2.1.2 红细胞膜形态学改变 |
| 2.2 表面活性剂溶血机理 |
| 2.2.1 渗透裂解 |
| 2.2.2 膜溶解 |
| 3 本论文研究思路 |
| 第一章 PEG-Bola型非离子表面活性剂的合成与性能研究 |
| 1.1 实验材料与仪器 |
| 1.1.1 实验试剂 |
| 1.1.2 实验仪器 |
| 1.1.3 实验动物 |
| 1.1.4 PEG-Bola型非离子表面活性剂合成路线 |
| 1.2 实验部分 |
| 1.2.1 二-十一烯酸十二醇二酯的合成 |
| 1.2.2 二-10-环氧十一烷酸十二烷基二醇酯的合成 |
| 1.2.3 二-11(10)PEG300,二-10(11)-羟基-十一烷酸十二烷基二醇酯的合成 |
| 1.3 测试与表征 |
| 1.3.1 纯度检查方法 |
| 1.3.2 结构确定 |
| 1.3.3 表面张力和临界胶束浓度 |
| 1.3.4 亲水亲油平衡值(HLB) |
| 1.3.5 增溶性 |
| 1.3.6 溶血性 |
| 1.3.6.1 血细胞混悬液的配制 |
| 1.3.6.2 溶血率测试具体步骤 |
| 1.3.7 综合评价 |
| 1.4 结果与讨论 |
| 1.4.1 纯度分析 |
| 1.4.2 结构鉴定 |
| 1.4.3 PEG-Bola型非离子表面活性剂的性能研究 |
| 1.4.3.1 PEG-Bola非离子表面活性剂的表面活性 |
| 1.4.3.2 PEG-Bola非离子表面活性剂的增溶活性 |
| 1.4.3.3 溶血安全性 |
| 第二章 PEG-Gemini型非离子表面活性剂的合成与性能研究 |
| 2.1 实验材料与仪器 |
| 2.1.1 实验试剂与仪器 |
| 2.1.2 PEG-Bola型非离子表面活性剂合成路线 |
| 2.2 合成步骤 |
| 2.2.1 二-油酸十二烷基二醇二酯的合成 |
| 2.2.2 二-8-环氧十八烷酸十二烷基二醇二酯的合成 |
| 2.2.3 二-9(8)PEG300,二-8(9)-羟基-十八烷酸十二烷基二醇二酯的合成 |
| 2.2.4 分离与纯化 |
| 2.3 测试与表征 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 DUADAE-PEGE的制备、分离纯度分析 |
| 2.4.2 结构鉴定 |
| 2.4.3 表征及安全有效性评价 |
| 2.4.3.1 表面活性 |
| 2.4.3.2 增溶活性 |
| 2.4.3.3 溶血安全性 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简介 |
（3）氯离子和磷酸盐离子载体的合成及对细胞活性的干扰作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 载体的研究概述 |
| 1.1.1 聚合物载体 |
| 1.1.2 二维材料载体 |
| 1.1.3 其他类型载体 |
| 1.2 离子对细胞活性的干扰研究 |
| 1.2.1 阳离子对细胞活性的干扰研究 |
| 1.2.2 阴离子对细胞活性的干扰研究 |
| 1.3 阴离子载体的研究进展 |
| 1.3.1 氯离子载体 |
| 1.3.2 磷酸盐离子载体 |
| 1.4 本论文的研究内容和设计思路 |
| 参考文献 |
| 第二章 以6-甲氧基喹啉为单体的超交联聚合物用作氯离子载体 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 试剂与仪器 |
| 2.2.2 分析与表征仪器 |
| 2.2.3 HCPs-meq的制备 |
| 2.2.4 吸附实验 |
| 2.2.5 荧光分析 |
| 2.2.6 Zeta电势测定 |
| 2.3 结果讨论 |
| 2.3.1 材料表征 |
| 2.3.2 pH对吸附效果的影响 |
| 2.3.3 HCPs-meq的选择性 |
| 2.3.4 吸附平衡曲线 |
| 2.3.5 荧光性质考察 |
| 2.4 结论及展望 |
| 参考文献 |
| 第三章 基于pH响应的聚酰腙胶束作为磷酸阴离子载体 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 实验试剂 |
| 3.2.2 测试与表征仪器 |
| 3.2.3 聚乙二醇二甲酯的制备 |
| 3.2.4 聚乙二醇二酰肼的制备 |
| 3.2.5 PGAH的制备 |
| 3.2.6 异硫氰酸荧光素的修饰 |
| 3.2.7 测试表征 |
| 3.2.8 吸附及解吸释放实验 |
| 3.2.9.细胞培养和细胞毒性实验 |
| 3.2.10 细胞吞摄实验 |
| 3.2.11 细胞凋亡实验 |
| 3.2.12 罗丹明123成像实验 |
| 3.3 结果讨论 |
| 3.3.1 材料表征 |
| 3.3.2 不同pH条件下的吸附及Zeta电势 |
| 3.3.3 PGAH对离子吸附的选择性 |
| 3.3.4 吸附等温及动力学模型 |
| 3.3.5 释放实验 |
| 3.3.6 细胞毒性实验 |
| 3.3.7 细胞吞摄实验 |
| 3.3.8 细胞凋亡和坏死实验 |
| 3.3.9 罗丹明123成像实验 |
| 3.4 小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 负载青蒿琥酯的黑磷纳米片作为磷酸盐阴离子载体 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 实验试剂 |
| 4.2.2 分析及表征仪器 |
| 4.2.3 少层BPs纳米片的制备 |
| 4.2.4 BPs/ART@PDA的制备 |
| 4.2.5 BPs/ART@PDA-HA/FA的制备 |
| 4.2.6 ART上载率测定 |
| 4.2.7 BPs/ART@PDA-FA/HA表征测试 |
| 4.2.8 BPs@PDA的 pH响应测试 |
| 4.2.9 BPs/ART@PDA降解机理测试 |
| 4.2.10 细胞培养及细胞毒性实验 |
| 4.2.11 细胞吞摄及靶向实验 |
| 4.2.12 细胞活性氧水平测定 |
| 4.2.13 磷酸盐离子的细胞成像 |
| 4.2.14 细胞凋亡和坏死实验 |
| 4.2.15 细胞钙离子水平的测定 |
| 4.3 结果讨论 |
| 4.3.1 材料表征 |
| 4.3.2 BPs@PDA的 pH响应和BPs/ART@PDA降解机理分析 |
| 4.3.3 细胞吞摄及靶向实验 |
| 4.3.4 活性氧细胞成像 |
| 4.3.5 磷酸盐离子的细胞成像 |
| 4.3.6 细胞毒性实验 |
| 4.3.7 细胞钙离子水平的测定 |
| 4.3.8 细胞凋亡和坏死实验 |
| 4.4 小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 总结与展望 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（4）基于光学纳米材料的阵列传感、生物成像及H2S光热产生研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 本文所用英文缩写词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 概述 |
| 1.2 不同功能纳米材料的光学效应 |
| 1.2.1 纳米材料光致发光效应 |
| 1.2.2 纳米材料的光热效应 |
| 1.2.3 纳米材料的表面等离子体共振效应 |
| 1.2.4 表面增强拉曼散射效应 |
| 1.3 光学纳米材料在生物医学中的应用 |
| 1.3.1 光学纳米材料在生物传感中的应用研究 |
| 1.3.2 光学纳米材料在生物成像中的应用研究 |
| 1.3.3 光学纳米材料在诊疗方面的应用 |
| 1.4 功能化纳米材料在气体分子治疗中的应用 |
| 1.4.1 功能化纳米材料在一氧化碳气体治疗中的作用 |
| 1.4.2 功能化纳米材料在一氧化氮气体治疗中的应用 |
| 1.4.3 功能化纳米材料在硫化氢气体治疗中的应用 |
| 1.5 本文构思 |
| 第2章 基于量子点—荧光染料FRET纳米胶束的血清蛋白阵列传感研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 试剂与仪器 |
| 2.2.2 不同纳米胶束的制备 |
| 2.2.3 纳米胶束的表征 |
| 2.2.4 阵列传感器的构建 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 实验原理 |
| 2.3.2 纳米胶束的表征 |
| 2.3.3 蛋白诱导纳米胶束解组装 |
| 2.3.4 模式传感阵列对不同蛋白质的响应 |
| 2.3.5 模式传感阵列对未知浓度蛋白质的响应 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 基于量子点—亚甲基蓝FRET纳米胶束的近红外生物成像研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 试剂与仪器 |
| 3.2.2 量子点-亚甲基蓝纳米胶束的制备 |
| 3.2.3 纳米胶束的表征 |
| 3.2.4 纳米胶束的细胞毒性考察 |
| 3.2.5 荧光纳米胶束用于HepG2细胞荧光成像 |
| 3.2.6 荧光纳米胶束用于活体近红外成像 |
| 3.2.7 荧光共振能量转移效率及量子产率计算 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 实验原理 |
| 3.3.2 纳米胶束的合成与表征 |
| 3.3.3 纳米胶束的稳定性 |
| 3.3.4 纳米胶束用于肿瘤细胞成像 |
| 3.3.5 纳米胶束用于活体近红外荧光成像 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 二硫代氨基甲酸盐介导金纳米颗粒的仿生合成及其细胞成像应用 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 试剂与仪器 |
| 4.2.2 仿生合成金纳米颗粒 |
| 4.2.3 光谱与形貌表征 |
| 4.2.4 细胞毒性考察 |
| 4.2.5 肿瘤细胞表面增强拉曼成像 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 金纳米颗粒仿生合成原理 |
| 4.3.2 二硫代氨基甲酸盐前体的合成 |
| 4.3.3 热降解合成仿生金纳米颗粒 |
| 4.3.4 细胞毒性的考察 |
| 4.3.5 金颗粒的表面增强效应拉曼效应 |
| 4.3.6 表面增强拉曼细胞成像 |
| 4.4 小结 |
| 第5章 包载二硫代氨基甲酸盐和金银合金颗粒的聚合物微米球用于H_2S的光热产生及其细胞应用研究 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 试剂与仪器 |
| 5.2.2 H_2S供体的合成及表征 |
| 5.2.3 金银合金颗粒的制备与表征 |
| 5.2.4 载体聚合物微米球的合成与表征 |
| 5.2.5 光热产生的H_2S与细胞的相互作用 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 实验原理 |
| 5.3.2 H_2S供体的合成与表征 |
| 5.3.3 光热金银合金颗粒的结构性能表征 |
| 5.3.4 H_2S供体与光热金银合金的聚合物微米球的装载 |
| 5.3.5 聚合物微米球光热产生H_2S |
| 5.3.6 H_2S的释放及与细胞的相互作用 |
| 5.4 小结 |
| 第6章 基于二硫代氨基甲酸盐-还原氧化石墨烯的H_2S光热产生及细胞内自由基清除研究 |
| 6.1 前言 |
| 6.2 实验部分 |
| 6.2.1 试剂与仪器 |
| 6.2.2 H_2S供体的合成及表征 |
| 6.2.3 还原氧化石墨烯的合成与表征 |
| 6.2.4 还原氧化石墨烯纳米复合物的构建与表征 |
| 6.2.5 纳米复合物光热产生H_2S |
| 6.2.6 细胞毒性考察 |
| 6.2.7 细胞内光热产生H_2S考察 |
| 6.2.8 细胞内ROS水平的考察 |
| 6.2.9 细胞内Caspase 3活性检测 |
| 6.3 结果与讨论 |
| 6.3.1 实验原理 |
| 6.3.2 H_2S供体的合成与表征 |
| 6.3.3 还原氧化石墨烯的合成与表征 |
| 6.3.4 还原氧化石墨烯纳米复合物的构建与表征 |
| 6.3.5 还原氧化石墨烯纳米复合物的光热产生H_2S考察 |
| 6.3.6 细胞毒性考察 |
| 6.3.7 还原氧化石墨烯复合物的细胞内H_2S光热产生考察 |
| 6.3.8 细胞内ROS水平的考察 |
| 6.3.9 细胞内Caspase 3活性检测 |
| 6.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录A 攻读博士学位期间所发表和拟发表的学术论文 |
| 致谢 |
（5）嵌段分子—多金属氧簇超分子复合体系组装与结构研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 多金属氧簇组装化学研究进展 |
| 第一节 多金属氧簇简介 |
| 1.1.1 多金属氧簇的结构与基本性质 |
| 1.1.2 多金属氧簇合成化学发展概述 |
| 1.1.3 多金属氧簇的功能及应用 |
| 第二节 多金属氧簇组装化学 |
| 1.2.1 多金属氧簇自组装 |
| 1.2.2 共价修饰多金属氧簇自组装 |
| 1.2.3 聚电解质-多金属氧簇组装 |
| 第三节 两亲分子-多金属氧簇超分子组装 |
| 1.3.1 表面活性剂-多金属氧簇组装 |
| 1.3.2 表面活性剂包覆的多金属氧簇复合物 |
| 第四节 嵌段共聚物-多金属氧簇超分子组装 |
| 1.4.1 嵌段共聚物自组装简介 |
| 1.4.1-1 嵌段共聚物在体相中的自组装 |
| 1.4.1-2 嵌段共聚物在溶液中的自组装 |
| 1.4.1-3 嵌段共聚物与两亲分子自组装行为比较 |
| 1.4.2 嵌段共聚物-多金属氧簇复合物自组装 |
| 第五节 论文出发点与工作思路 |
| 参考文献 |
| 第二章 嵌段分子-多金属氧簇复合体的组装与解组装 |
| 第一节 实验与材料制备 |
| 2.1.1 实验试剂 |
| 2.1.2 测试仪器 |
| 2.1.3 嵌段分子合成 |
| 2.1.4 复合体制备 |
| 2.1.5 聚集过程透射电镜监测 |
| 第二节 嵌段分子-多金属氧簇复合体自组装 |
| 2.2.1 复合体的化学组成 |
| 2.2.2 复合体聚集结构表征 |
| 2.2.3 复合体聚集结构形成过程及条件 |
| 第三节 嵌段分子-多金属氧簇复合体解组装 |
| 2.3.1 水溶液中复合体纳米纤维结构 |
| 2.3.2 季铵基团在解组装过程中的作用 |
| 第四节 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 嵌段分子-多金属氧簇复合物热致液晶 |
| 第一节 实验与材料制备 |
| 3.1.1 实验试剂 |
| 3.1.2 测试仪器 |
| 3.1.3 嵌段分子合成 |
| 3.1.4 复合物制备 |
| 第二节 嵌段分子热致液晶 |
| 第三节 嵌段分子-多金属氧簇复合物热致液晶 |
| 3.3.1 复合物的化学组成 |
| 3.3.2 复合物热性质与聚集结构 |
| 第四节 小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 多金属氧簇诱导嵌段共聚物胶束化 |
| 第一节 实验部分 |
| 4.1.1 实验试剂 |
| 4.1.2 测试仪器 |
| 4.1.3 复合体胶束制备 |
| 第二节 多金属氧簇诱导嵌段共聚物复合体聚集与结构 |
| 4.2.1 多金属氧簇诱导嵌段共聚物胶束化 |
| 4.2.2 嵌段共聚物-磷钨酸复合体胶束 |
| 4.2.3 嵌段共聚物-硅钨酸复合体胶束 |
| 4.2.4 多金属氧簇电荷及掺杂量影响 |
| 第三节 复合体胶束的稳定性 |
| 第四节 小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 结论 |
| 作者简历 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（6）BuforinⅡ抗菌肽的分子设计及对DNA作用抑菌机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 抗菌肽的生物学活性 |
| 1.2 抗菌肽的理化性质及结构特征 |
| 1.3 抗菌肽的应用前景 |
| 1.4 抗菌肽的抑菌作用机理 |
| 1.4.1 作用于微生物细胞膜的杀伤机制 |
| 1.4.2 抑制细胞的呼吸作用 |
| 1.4.3 抑制细胞壁形成 |
| 1.4.4 通过非膜性的外部靶点发挥作用 |
| 1.4.5 作用胞内生物大分子 |
| 1.5 抗菌肽的构效关系及分子设计 |
| 1.5.1 抗菌肽的结构和活性关系 |
| 1.5.2 抗菌肽基于膜作用的分子设计 |
| 1.6 抗菌肽Buforin的研究进展 |
| 1.7 本论文的研究内容及思路 |
| 参考文献 |
| 第二章 Buforin Ⅱ衍生肽的分子设计和结构预测 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 分析工具 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 抗菌肽的物理化学特性分析 |
| 2.3.2 二级结构分析 |
| 2.3.3 跨膜预测 |
| 2.3.4 疏水性及C-端两亲性分析 |
| 2.3.5 空间结构模拟 |
| 2.3.6 抗菌肽的固相合成 |
| 2.3.7 圆二色谱测定 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 抗菌肽BF2-X的设计 |
| 2.4.2 抗菌肽BF2-A/X的物理化学特性分析 |
| 2.4.3 二级结构分析 |
| 2.4.4 跨膜预测 |
| 2.4.5 肽的疏水性及C-端两亲性分析 |
| 2.4.6 抗菌肽的空间结构模拟 |
| 2.4.7 圆二色谱 |
| 2.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 抗菌肽BF2-A/X的生物活性和物化特性研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 菌株 |
| 3.2.2 培养基 |
| 3.2.3 主要试剂 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 微生物的培养 |
| 3.3.2 抗菌活性测定方法 |
| 3.3.3 抗菌肽BF2-A/X的抗菌活性测定 |
| 3.3.4 抗菌肽对细菌生长的影响 |
| 3.3.5 抗菌肽体外溶血实验 |
| 3.3.6 抗菌肽抑制肿瘤细胞Hep-G2体外增殖的活性 |
| 3.3.7 抗菌肽结合脂多糖中和内毒素的活性 |
| 3.3.8 抗菌肽BF2-A/X稳定性检测 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 抗菌肽BF2-A/X的抗菌活性检测 |
| 3.4.2 抗菌肽对细菌生长的影响 |
| 3.4.3 抗菌肽体外溶血活性 |
| 3.4.4 抗菌肽抑肿瘤细胞活性 |
| 3.4.5 抗菌肽中和内毒素的活性 |
| 3.4.6 抗菌肽的稳定性研究 |
| 3.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 抗菌肽BF2-A/X对细菌细胞膜作用机制的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 培养基与缓冲液 |
| 4.2.2 主要试剂 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 抗菌肽对细菌细胞表面特性的影响 |
| 4.3.2 抗菌肽与脂质体的相互作用 |
| 4.3.3 抗菌肽对G-菌外膜的渗透性 |
| 4.3.4 抗菌肽对细胞质膜的渗透性 |
| 4.3.5 抗菌肽引起胞内K+的泄漏 |
| 4.3.6 透射电镜观察抗菌肽对细菌胞膜的影响 |
| 4.3.7 流式细胞仪分析细菌胞膜完整性 |
| 4.3.8 抗菌肽BF2-A/X穿透细菌胞膜效率的比较 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 抗菌肽对细菌细胞表面特性的影响 |
| 4.4.2 抗菌肽与脂质体的相互作用 |
| 4.4.3 抗菌肽对G-菌外膜的渗透性 |
| 4.4.4 抗菌肽对细胞内膜的渗透性影响 |
| 4.4.5 抗菌肽引起的细菌胞内离子泄漏 |
| 4.4.6 透射电镜观察抗菌肽对细菌胞膜的影响 |
| 4.4.7 流式细胞仪分析细菌胞膜完整性 |
| 4.4.8 抗菌肽BF2-A/X穿透细菌胞膜效率的比较 |
| 4.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 抗菌肽BF2-A/X对细菌DNA作用机制的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验试剂 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 抗菌肽在大肠杆菌细胞里的累积 |
| 5.3.2 抗菌肽与细菌作用后对基因组DNA的影响 |
| 5.3.3 DNA-肽结合凝胶阻滞实验 |
| 5.3.4 RNA-肽结合凝胶阻滞实验 |
| 5.3.5 原子力显微镜扫描抗菌肽与DNA 的结合 |
| 5.3.6 圆二色谱检测结合肽后DNA的结构 |
| 5.3.7 抗菌肽与EB竞争性结合DNA的荧光光谱分析 |
| 5.3.8 磷酸盐溶液对抗菌肽与DNA 相互作用的影响 |
| 5.3.9 抗菌肽与DNA的特异性结合研究 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 抗菌肽在大肠杆菌细胞里的累积 |
| 5.4.2 抗菌肽与细菌作用后对基因组DNA的影响 |
| 5.4.3 DNA-肽结合凝胶阻滞实验 |
| 5.4.4 RNA-肽结合凝胶阻滞实验 |
| 5.4.5 原子力显微镜扫描抗菌肽与DNA 的结合 |
| 5.4.6 DNA的圆二色谱图 |
| 5.4.7 抗菌肽与EB竞争性结合DNA的荧光光谱分析 |
| 5.4.8 磷酸盐溶液对抗菌肽与DNA 相互作用的影响 |
| 5.4.9 抗菌肽与DNA的特异性结合研究 |
| 5.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第六章 抗菌肽BF2-A/X作用细菌后对生理代谢的影响 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 主要试剂 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 抗菌肽作用大肠杆菌后对细胞DNA合成能力的影响 |
| 6.3.2 抗菌肽作用大肠杆菌后对细胞RNA合成能力的影响 |
| 6.3.3 抗菌肽作用大肠杆菌后对细胞总蛋白合成能力的影响 |
| 6.3.4 抗菌肽作用细菌后对β-半乳糖苷酶表达活性的影响 |
| 6.3.5 抗菌肽作用细菌后对碱性磷酸酶表达活性的影响 |
| 6.3.6 抗菌肽作用细菌后对细胞呼吸作用的影响 |
| 6.3.7 抗菌肽作用细菌后对细胞ATP生产的影响 |
| 6.4 结果与讨论 |
| 6.4.1 抗菌肽作用细菌后对DNA合成的影响 |
| 6.4.2 抗菌肽作用细菌后对RNA合成的影响 |
| 6.4.3 抗菌肽作用细菌后对总蛋白合成能力的影响 |
| 6.4.4 抗菌肽作用细菌后对β-半乳糖苷酶表达活性的影响 |
| 6.4.5 抗菌肽作用细菌后对碱性磷酸酶表达活性的影响 |
| 6.4.6 抗菌肽作用细菌后对细胞呼吸作用的影响 |
| 6.4.7 抗菌肽作用细菌后对细胞产ATP的影响 |
| 6.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 论文结论与创新点 |
| 一、论文主要结论 |
| 二、论文创新点 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表论文清单 |
| 附录 |
（7）转基因植物安全筛选标记基因的克隆和NAMP/Bt融合蛋白基因克隆及其原核与植物表达载体的构建（论文提纲范文）
| 第一部分 转基因植物安全筛选标记基因的克隆 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| Ⅰ文献综述 |
| 1.1 国内外安全筛选标记的研究进展 |
| 1.1.1 目前使用的筛选标记 |
| 1.1.2 选择标记基因的应用 |
| 1.1.3 选择标记基因存在的问题 |
| 1.1.4 安全筛选标记的研究和作用机理 |
| 1.2 D-丝氨酸脱水酶基因获得及应用 |
| 1.2.1 dsdA 的来源和获得 |
| 1.2.2 dsdA 的作用机理 |
| 1.2.3 dsdA 的应用 |
| Ⅱ技术路线 |
| Ⅲ试验材料与方法 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 菌株和质粒 |
| 3.1.3 酶与试剂 |
| 3.1.4 引物设计 |
| 3.1.5 培养基 |
| 3.1.6 主要溶液成分 |
| 3.1.7 仪器设备 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 大肠肝菌的培养和处理 |
| 3.2.2 通过PCR 获得dsdA 基因 |
| 3.2.3 目的片段的回收 |
| 3.2.4 目的片段（dsdA）与pGM-T Vector 的连接 |
| 3.2.5 大肠杆菌感受态细胞的转化 |
| 3.2.6 小量碱裂解法提取质粒 |
| 3.2.7 重组质粒的鉴定 |
| 3.2.8 dsdA 基因的原核表达载体的构建及其表达 |
| 3.2.9 具有dsdA 基因的植物表达载体构建 |
| 3.2.10 质粒pBI-dsdA 的大量提取（碱裂解法） |
| 3.2.11 遗传转化 |
| 3.2.12 转基因烟草的检测 |
| Ⅳ结果与分析 |
| 4.1 D-丝氨酸脱水酶基因（dsdA）的克隆鉴定和序列分析 |
| 4.2.d sdA 基因原核表达载体的构建及其表达 |
| 4.2.1 dsdA 基因原核表达载体的构建 |
| 4.2.2 dsdA 基因在原核系统中的表达 |
| 4.3 具有dsdA 基因植物表达载体的构建 |
| 4.4 dsdA 基因植物表达载体对烟草的转化 |
| 4.4.1 转化方法 |
| 4.4.2 转化后烟草小植株的再生 |
| 4.5 转基因烟草的分子生物学鉴 |
| 4.5.1 转基因烟草的PCR 检测 |
| 4.6 D-丝氨酸和卡那霉素对比筛选的结果 |
| Ⅴ讨论 |
| 第二部分 NAMP/Bt 融合蛋白基因克隆及其原核与真核表达载体的构建 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| Ⅰ综述 |
| 1.1 真菌病害的现状 |
| 1.2 抗菌肽基因的研究及其应用 |
| 1.3 抗菌肽的发现 |
| 1.4 抗菌肽的作用机理 |
| 1.5 苏云金芽孢杆菌（Bt）毒蛋白基因 |
| 1.6 Bt 抗虫植物的研究进展 |
| 1.7 融合基因的获得 |
| Ⅱ技术路线 |
| Ⅲ试验材料与方法 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 植物材料 |
| 3.1.2 菌株和质粒 |
| 3.1.3 酶与试剂 |
| 3.1.4 引物设计 |
| 3.1.5 培养基 |
| 3.1.6 主要溶液成分 |
| 3.1.7 仪器设备 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 新植物抗菌肽(NAMP)的获得 |
| 3.2.2 Bt 定点突变和融合基因的获得 |
| 3.2.3 NAMP-Bt 基因的原核表达载体的构建及其表达 |
| 3.2.4 具有NAMP-Bt 基因的植物表达载体构建 |
| 3.2.5 遗传转化 |
| Ⅳ结果与分析 |
| 4.1 融合基因NAMP-Bt 的获得 |
| 4.1.1 通过PCR 给AMP 加上甘氨酸接头形成NAMP |
| 4.2 NAMP-Bt 融合基因原核表达载体的构建和表达 |
| 4.2.1 NAMP-Bt 基因在原核系统中的表达 |
| 4.3 具有NAMP-Bt 基因植物表达载体的构建 |
| 4.4 农杆菌介导的含NAMP-Bt 基因植物表达载体对烟草的转化 |
| 4.4.1 工程菌pBI-NAMP-Bt/LBA4404 的检测 |
| 4.4.2 农杆菌侵染后烟草小植株的再生 |
| 4.5 转基因烟草的抗性鉴定和分子生物学鉴定 |
| 4.5.1 卡那霉素的鉴定 |
| 4.5.2 转基因烟草的PCR 检测 |
| 4.5.3 Southern blot |
| 4.5.4 烟草植株的抗虫性研究 |
| Ⅴ讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、Study of the Ion Channel Behavior of Didodecyldimethylammonium Bromide Formed Bilayer Lipid Membrane Stimulated by PF_6~-（论文参考文献）
- [1]金属离子调制变构智能芳香螺旋结构的设计合成及其应用研究[D]. 白东亚. 河南大学, 2020(02)
- [2]两种注射用增溶辅料的设计合成[D]. 花昌林. 江西中医药大学, 2020(05)
- [3]氯离子和磷酸盐离子载体的合成及对细胞活性的干扰作用[D]. 马春萌. 兰州大学, 2020(01)
- [4]基于光学纳米材料的阵列传感、生物成像及H2S光热产生研究[D]. 李力. 湖南大学, 2017(06)
- [5]嵌段分子—多金属氧簇超分子复合体系组装与结构研究[D]. 林显坤. 吉林大学, 2010(05)
- [6]BuforinⅡ抗菌肽的分子设计及对DNA作用抑菌机理研究[D]. 郝刚. 江南大学, 2009(12)
- [7]转基因植物安全筛选标记基因的克隆和NAMP/Bt融合蛋白基因克隆及其原核与植物表达载体的构建[D]. 张楠. 新疆农业大学, 2007(02)